Razlika med HPLC in LCMS

Ključna razlika - HPLC proti LCMS
 

Naj najprej pogledamo pomen HPLC in LCMS, preden analiziramo razliko med HPLC in LCMS. Kromatografija je tehnika ločevanja v kemijski analizi, pri kateri se sestavine vzorca ločijo med prehodom skozi kromatografski medij. Vključuje tudi interakcijo z vzorcem, stacionarno fazo in mobilno fazo. HPLC pomeni Tekoča kromatografija visoke ločljivosti, in se uporablja kot metoda tekoče kromatografije v analitični kemiji. Kombinacija Tekoča kromatografija in masna spektroskopija (LCMS) je bil razvit za kvantitativno analizo izbranih biomolekul in je zelo občutljiv, natančen in specifičen postopek analize v primerjavi s HPLC. To je ključna razlika med HPLC in LCMC. Ta članek vas bo seznanil s HPLC in LCMC, ki se ukvarjata s kemijsko analizo, in obravnaval razlike med HPLC in LCMS.

Kaj je HPLC?

Visokozmogljiva tekočinska kromatografija (HPLC) je priljubljena ločitvena tehnika v analitični kemiji. V glavnem je uporablja se za ločevanje komponent, za določitev in količinsko določitev vsake komponente v mešanici. Že prej je bila ta metoda znana kot visokotlačna tekočinska kromatografija ker je bilo od črpalk odvisno, da se tekoče topilo pod tlakom, ki vsebuje vzorčno zmes, pretaka skozi kolono, napolnjeno s trdnim adsorbentnim materialom. Vsaka sestavina vzorčne mešanice se medsebojno razlikuje s trdnim adsorbentnim materialom, kar ima za posledico različne stopnje pretoka za različne sestavine. To lahko privede do ločitve sestavnih delov, ko tečejo iz stolpca HPLC.

HPLC se uporablja za različne aplikacije kot naprimer analiza ravni vitamina D v krvi, nezakonita uporaba drog športnikov z odkrivanjem ostankov zdravila v njihovem urinu, razvrščanje sestavin kompleksnega biološkega vzorca za raziskovalne namene in analize ter proizvodnja farmacevtskih izdelkov.

Kaj je LCMS?

Tekoča kromatografija-masna spektrometrija (LCMS) je analitična tehnika, ki združuje fizične separacijske sposobnosti tekoče kromatografije s sposobnostjo masne analize masne spektrometrije (MS). Tekoča kromatografija je tehnika ločevanja, masna spektrometrija pa se uporablja za analizo razmerja med maso in nabojem nabitih delcev. Fizično ločitev običajno dosežemo s HPLC, alternativno pa poznamo tudi LCMS HPLC-MS. LCMS je a prevladujoča analitična tehnika ki ima a zelo visoka natančnost, občutljivost in specifičnost v primerjavi s HPLC. Tako je uporaben v številnih aplikacijah, kot so raziskovalne namene, analiza zdravil, analiza hrane itd. V glavnem LCMS uporablja se za ločevanje, odkrivanje, prepoznavanje in količinsko določanje biokemijskih lastnosti določenega vzorca v prisotnosti zapletenih kemičnih zmesi.

Kaj je razlika med HPLC in LCMC?

Akronim in opredelitev HPLC in LCMC

HPLC: HPLC pomeni visokozmogljiva tekočinska kromatografija. Gre za tehniko ločevanja, ki se v glavnem uporablja za ločevanje komponent, za identifikacijo in količinsko določitev vsake komponente v mešanici.

LCMS: LCMS pomeniTekoča kromatografija in masna spektrometrija. Gre za analitično tehniko, ki združuje fizične sposobnosti ločevanja tekoče kromatografije s sposobnostjo masne analize masne spektrometrije (MS).

Značilnosti HPLC in LCMC

Razvrstitev

HPLC: To je samo metoda tekoče kromatografije.

LCMS: To je kombinacija metode tekoče kromatografije in metode masne spektrometrije.

Učinkovitost

HPLC: V primerjavi s LCMS je analiza HPLC manj učinkovita in počasnejša.

LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS učinkovita in hitrejša.

Občutljivost

HPLC: V primerjavi s LCMS je analiza HPLC manj občutljiva.

LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS bolj občutljiva.

Specifičnost

HPLC: V primerjavi s LCMS je analiza HPLC manj specifična.

LCMS: V primerjavi s HPLC je analiza LCMS bolj specifična.

Natančnost

HPLC: HPLC daje manj natančne rezultate kot LCMS za določanje nekaterih kemikalij.

LCMS: LCMS daje bolj natančne rezultate kot HPLC za določanje nekaterih kemikalij.

Komponenta

HPLC: HPLC lahko štejemo kot sestavni del LCMS.

LCMS: LCMS ni mogoče obravnavati kot sestavni del HPLC.

Ionski vir

HPLC: Ionskega vira ni v instrumentu HPLC.

LCMS: Ionski vir je prisoten v instrumentu LCMS.

Prijave

HPLC: Ioni, polimeri, organske molekule in biomolekule lahko analiziramo s HPLC.

LCMS: Lahko se analizirajo organske molekule in biomolekule. V nasprotju s HPLC se lahko LCMS uporablja za pregled nepopolno raztopljenih zmesi.

Delovanje

HPLC: Diagram instrumenta HPLC je prikazan na sliki 1 in običajno vključuje avtosampler, črpalke in detektor. Vzorčevalna mešanica vstavi vzorčno zmes v gibljivo fazo (mešanica topil pod tlakom, kot so voda, acetonitril in / ali metanol), ki jo prenese v kolono. Črpalke skozi kolono oddajo želeni pretok in sestavo mobilne faze. Stolpec je napolnjen z adsorbentom, ki je zrnat trden delec, kot je kremen ali polimeri. Detektor odda signal, sorazmeren količini prisotnosti sestavin vzorca v koloni, zato omogoča izmerljivo analizo izbranih sestavin vzorca. Instrument HPLC je nadzorovan, analizo podatkov pa zagotavlja digitalni mikroprocesor in uporabniška programska oprema.

Slika 1: Shema instrumenta HPLC

LCMS: Diagram LCMS instrumenta je prikazan na sliki 2. Ekstrakt vzorca se vstavi v stolpec, sestavljen iz HPLC. V tem stolpcu so shranjeni vzorčni presnovki na osnovi fizičnih znakov in različni presnovki se v različnih časovnih intervalih pretakajo na masni spektrometer. Masna spektroskopija se uporablja za ocenjevanje mase delcev, za določanje elementarne razporeditve molekule in za razjasnitev molekulskih struktur. Vendar je treba vzorec ionizirati, da nastanejo napolnjene molekule, da se določi njihovo razmerje med maso in nabojem. Zato namesto instrumentov HPLC LCMS sestavljajo dodatni trije moduli, na primer vir železa, analizator mase in detektor. Izvor ionov lahko pretvori vzorec plinske faze v ione in masni analizator, ki ione združuje po njihovih masah z uporabo elektromagnetnih polj. Nazadnje detektor količinsko opredeli vrednosti in poda podatke o vsakem ionu, ki je prisoten v vzorcu. LCMS tehniko lahko uporabimo tako za kvalitativne kot za količinske aplikacije.

  Slika 2: Shema instrumenta LCMS

Za zaključek je HPLC metoda tekoče kromatografije, medtem ko je LCMS kombinacija tekočinske kromatografije in masne spektrometrije. Obe teh tehnik analize imata različne značilnosti, vendar ju je mogoče uporabiti za identifikacijo in količinsko opredelitev sestavkov hrane, farmacevtskih izdelkov in drugih bioaktivnih molekul.

Literatura Arpino, P. (1992). Masna spektrometrija s kombinirano tekočinsko kromatografijo. III. Del Uporaba termospreja. Ocene množične spektrometrije, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. in Spoendlin, C. (2004). Praktični vidiki tekoče kromatografije s povratno fazo z uporabo 3 μm kolona z delci in monolitnih kolon v farmacevtskem razvoju in proizvodnji, ki deluje v skladu s trenutno dobro proizvodno prakso. Časopis za kromatografijo, 1036 (2): 127–133. Lee, M. S. in Kerns, E. H. (1999). Uporaba LC / MS pri razvoju zdravil. Ocene množične spektrometrije, 18 (3-4): 187–279. Murray, K. K. (1997). Povezovanje laserske desorpcije / ionizacije z matriko na ločevanje tekočin. Ocene množične spektrometrije 16 (5): 283. Z dovoljenjem za slike: "Hplc", ki ga je nalagal originalni avtor, je bil Kjaergaard na spletni strani en.wikipedia - Preneseno iz en.wikipedia. (Javna domena) prek Commons