Razlika med HPLC in UPLC

The ključna razlika med HPLC in UPLC je, da je HPLC omogoča analizo delcev z velikostjo približno 5 mikrometrov, medtem ko UPLC omogoča veliko manjše delce okoli 2 mikrometrov.

HPLC in UPLC sta obe tekočinski kromatografski tehniki, ki sta uporabni pri ločevanju komponent spojine. Da bi poznali razliko med HPLC in UPLC, moramo najprej vedeti, kaj je HPLC. To je zato, ker je UPLC posebna različica HPLC in jo zlahka razumemo, če vemo, kaj je HPLC.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je HPLC
3. Kaj je UPLC
4. Primerjava ob strani - HPLC proti UPLC v tabeli
5. Povzetek

Kaj je HPLC?

Izraz HPLC pomeni visoko zmogljivost Tekoča kromatografija. To je tehnika, ki jo lahko uporabimo za ločevanje različnih sestavin spojine. Prav tako je najpogosteje uporabljena tehnika za določanje, količinsko opredelitev in ločevanje komponent mešanice. Poleg tega ta tehnika uporablja visok tlak za potiskanje topil skozi kolono. Poleg tega so glavne uporabe HPLC v biokemiji za analizo sestavin spojine. Je idealen način za ločevanje in identifikacijo aminokislin, nukleinskih kislin, beljakovin, ogljikovodikov, pesticidov, ogljikovih hidratov, antibiotikov, steroidov in neštetih drugih anorganskih snovi.

Slika 01: Sistem HPLC v laboratoriju

Na kratko, metoda delovanja tehnike HPLC je naslednja. Najprej bi morali v črko vnesti vzorec v tok mobilne faze s pomočjo črpalke. Tlak črpalke je treba vzdrževati na 40 MPa. Nato ta tok mobilne faze prodira skozi stolpec HPLC. Prav tako komponente v vzorcu preidejo skozi stolpec. Vendar se njihove hitrosti gibanja med seboj razlikujejo. Ta razlika nastane zaradi razlike v interakcijah med komponentami vzorca in adsorbentom v stolpcu. Temu adsorbentu rečemo stacionarna faza, ker je znotraj stolpca (ne premika se). Drugič, na koncu stolpca lahko zberemo vzorec, ki izhaja iz stolpca. Tam lahko določimo razlike v retencijskih časih za vsako komponento v vzorcu.

Kaj je UPLC?

Izraz UPLC pomeni Ultra visokozmogljiva tekočinska kromatografija. Gre za variacijo HPLC, vendar je način delovanja enak. Vendar pa za razliko od HPLC ta metoda omogoča analizo zelo majhnih delcev, na primer 2 mikrometra majhnih delcev.

Slika 02: UPLC naprava

Poleg tega omogoča hitrejšo analizo. V tej tehniki uporabljamo tlak črpalke 100 MPa za vstavljanje vzorca v kolono. Zato ta visok tlak potrjuje, da se ves vzorec vnese v kolono. Tako je to v primerjavi s HPLC zelo učinkovito.

Kakšna je razlika med HPLC in UPLC?

Izraz HPLC pomeni visokozmogljiva tekočinska kromatografija, medtem ko izraz UPLC pomeni ultra visokozmogljiva tekočinska kromatografija. Zato je tehnika UPLC razvita različica HPLC. Tako je način delovanja za obe tehniki enak. Vendar je UPLC učinkovitejši v primerjavi s HPLC, ker uporablja visok tlak črpalke; tlak črpalke za HPLC je 40 MPA, medtem ko je 100 MPa za UPLC. Zato je to razlika med HPLC in UPLC. Predvsem je ključna razlika med HPLC in UPLC v tem, da HPLC omogoča analizo delcev, katerih velikost je približno 5 mikrometrov, medtem ko UPLC omogoča veliko manjše delce okoli 2 mikrometrov.

Povzetek - HPLC proti UPLC

UPLC je oblika HPLC. Tako so metode delovanja enake. Toda v UPLC lahko najdemo nekaj izboljšanih funkcij v primerjavi s HPLC. Zato obstaja nekaj razlike med HPLC in UPLC. Ključna razlika med HPLC in UPLC pa je, da HPLC omogoča analizo delcev, katerih velikost je približno 5 mikrometrov, medtem ko UPLC omogoča veliko manjših delcev okoli 2 mikrometrov.

Referenca:

1. "Visokozmogljiva tekočinska kromatografija." Wikipedia, Fundacija Wikimedia, 20. 10. 2018. Dostopno tukaj
2. "UPLC." Wikipedia, fundacija Wikimedia, 25. oktobra 2017. Na voljo tukaj  

Vljudnost slik:

1. "Hplc" avtor Kjaergaard z angleške Wikipedije (javna domena) prek Commons Wikimedia 
2. "Slika naprave UPLC" avtorja Groep29 BFW - Lastno delo, (Public Domain) prek Commons Wikimedia