Razlika med HPLC in HPTLC

Ključna razlika - HPLC proti HPTLC
 

Ključna razlika med HPLC in HPTLC je v tem HPLC omogoča kvantitativno ločitev komponent v vzorcu, medtem ko HPTLC ne omogoča kvantitativne ločitve komponent v vzorcu.

Kromatografija je fizikalna ločitvena metoda, ki se uporablja za ločevanje in identifikacijo komponent v mešanici. Tako HPLC kot HPTLC sta kromatografski tehniki. HPLC je visokozmogljiva tekočinska kromatografija. HPTLC je visokozmogljiva tankoplastna kromatografija.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je HPLC
3. Kaj je HPTLC
4. Primerjava ob strani - HPLC proti HPTLC v tabeli
5. Povzetek

Kaj je HPLC?

HPLC je visokozmogljiva tekočinska kromatografija. To je analitična tehnika, ki se uporablja za ločevanje, identifikacijo in količinsko opredelitev komponent v mešanici. Pri tej tehniki se vzorec raztopi v primernem topilu. Nato topilo z vzorcem preide skozi črpalko z določenim tlakom. Črpalka je napolnjena s trdnim adsorbentnim materialom. Nato se nekatere komponente močno vežejo na vpojni material, medtem ko se druge komponente vežejo ohlapno. Zaradi tega imajo sestavni deli različno pretok skozi črpalko. Zato je mogoče komponente enostavno ločiti.

Slika 01: Sistem HPLC

Adsorbentni material, ki napolni črpalko, je znan kot stacionarna faza. Topilo z raztopljenim vzorcem je znano kot mobilna faza. Črpalka, uporabljena v tej tehniki, se imenuje stolpec. Stolpec je napolnjen z adsorbentnim materialom, najpogosteje delci kremena. Velikost teh delcev se lahko giblje od 2-50 µm. Na postopek ločevanja vpliva sestava mobilne faze in temperatura sistema. Interakcije med stacionarno fazo in komponento v vzorcu so lahko hidrofobne interakcije, dipol-dipolne interakcije, ionsko vezanje itd..

Delovni tlak HPLC je znatno višji od tlaka običajne tekočinske kromatografije. Leži okoli 50-350 barov. Razlika med tekočinsko kromatografijo in HPLC je v tem, da pri tekoči kromatografiji vzorec pade skozi steber pod gravitacijo, medtem ko je pri HPLC vzorec pod tlakom skozi kolono. Velikost kolone in vpojnih delcev je prav tako zelo majhna v primerjavi s tradicionalno tekočinsko kromatografijo. Vendar je ločljivost, ki jo daje tehnika HPLC, boljša.

Kaj je HPTLC?

HPTLC je visokozmogljiva tankoplastna kromatografija. Je napredna in avtomatizirana oblika tradicionalne TLC. Ta tehnika omogoča učinkovito ločljivost v kratkem časovnem obdobju. Pri tej metodi analize se lahko vzorec in referenca hkrati analizirata, kar omogoča primerjavo vzorca z referenco. Daje izboljšano analitično natančnost kot druge kromatografske tehnike. Čas, potreben za analizo, je krajši. Tehnika je poceni tehnika.

Slika 02: Analiza živilskih barvil s HPTLC

Metoda HPTLC je preprost postopek, odpravljen je tudi korak priprave vzorca (V tradicionalni TLC je korak pred ločevanjem vključen korak priprave vzorca. Ta korak vključuje čiščenje in obogatitev). Topilo je mogoče uporabiti neposredno brez predhodne obdelave, čeprav druge kromatografske tehnike zahtevajo predhodno obdelavo, kot je razplinjevanje, filtriranje itd..

Material, ki se uporablja v HPTLC, je kremen, ki ima zelo majhne velikosti delcev. V tradicionalni TLC je velikost delcev silicijevega dioksida 5–20 μm, medtem ko je pri HPTLC 4–8 μm. Vzorec se s pomočjo aplikatorja nanese na ploščo HPTLC. Daje enoten in varen nanos. Nato se plošče namestijo v komoro z mobilno fazo. Komora mora biti nasičena s paro mobilne faze. Po postopku HPTLC se lahko odkrijejo madeži. Pri odkrivanju pik na plošči HPTLC tehnika uporablja primerno UV območje ali jodno komoro.

Kakšna je razlika med HPLC in HPTLC?

HPLC proti HPTLC
HPLC je visokozmogljiva tekočinska kromatografija.	HPTLC je visokozmogljiva tankoplastna kromatografija.
Tehnika
V HPLC se mobilna faza s topilom prenese skozi kolono, napolnjeno s stacionarno fazo.	V HPTLC se vzorec opazi na TLC plošči in se namesti v komoro, ki vsebuje mobilno fazo; nato lahko vzorec selijo ploščo navzgor skupaj z mobilno fazo.
Merjenje
V HPLC se razlike med hitrostjo pretoka komponent skozi stolpec uporabljajo za ločevanje komponent v vzorcu.	V HPTLC se razlike med razdaljami, ki jih prevozi vsaka komponenta v vzorcu, uporabljajo za ločevanje komponent v vzorcu.
Kvantitativno ločevanje
HPLC omogoča kvantitativno ločitev komponent v vzorcu.	HPTLC ne dovoljuje količinskega ločevanja komponent v vzorcu.

Povzetek - HPLC proti HPTLC

HPLC in HPTLC sta dve kromatografski tehniki. Ključna razlika med HPLC in HPTLC je, da HPLC omogoča kvantitativno ločitev komponent v vzorcu, medtem ko HPTLC ne omogoča kvantitativne ločitve komponent v vzorcu.

Referenca:

1. "Visokozmogljiva tekočinska kromatografija." Wikipedia, fundacija Wikimedia, 10. aprila 2018, dostopno tukaj.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30. maja 2011, na voljo tukaj.

Vljudnost slik:

1. "HPTLCplatetoMS" avtorja Kjaergaarda iz angleške Wikipedije - Premeščen iz en.wikipedia v Commons (Public Domain) prek Commons Wikimedia
2. "Hplc" PD Dr. rer. nat habil. Gertrud Morlock, izredni profesor (Privatdozentin), univerza v Hohenheimu inštitut za kemijo hrane - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) prek Commons Wikimedia