Razlika med gramskim madežem in kulturo

Ključna razlika - Gram Stain vs kultura
 

Gram obarvanje je tehnika obarvanja, ki se izvaja za razlikovanje bakterij v dve skupini glede na debelino peptidoglikanske plasti v njihovi celični steni. Kultura je metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijskih pogojih za različne analize. Ključna razlika med gramatičnimi madeži in kulturo je njihova funkcija; gram seva tehniko barvanja bakterij, kjer je kultura metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov.

VSEBINA
1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je Gram madež
3. Kaj je kultura
4. Primerjava ob strani - Gram Stain vs kultura
5. Povzetek

Kaj je Gram madež?

Barvanje po gramu je pomembna tehnika diferencialnega obarvanja, ki se uporablja za identifikacijo bakterij v mikrobiologiji. To tehniko je leta 1884 uvedel danski bakteriolog Hans Christian Gram. Barvanje po gramu razvršča bakterije v dve glavni skupini: gram pozitivno in gram negativno; te so zelo pomembne pri razvrščanju in identifikaciji bakterij. Barvanje po gramu se izvaja kot začetni korak za karakterizacijo bakterij.

Bakterije so razvrščene na podlagi razlik v njihovi celični steni. Gram pozitivne bakterije vsebujejo debelo peptidoglikansko plast v svoji celični steni, medtem ko Gram negativne bakterije vsebujejo tanko plast peptidoglikana v svoji celični steni, kot je prikazano na sliki 01. Rezultat obarvanja z gramom temelji na razliki v debelini peptidoglikanske plasti celične stene.

Slika 1: Gram pozitivne bakterije in gram negativne bakterije

Obarvanje zrn se izvaja s štirimi različnimi reagenti, in sicer; primarni madež, mordant, sredstvo za razbarvanje in proti madežem. Kristalna vijolica in safranin služita kot primarni in proti madežem, grami joda in 95% alkohola pa služijo kot mordant in razbarvalec..

Osnovni koraki Grams madež

1. Na čisti stekleni drsnik pripravimo bakterijski razmaz, toplotno pritrjen in ohlajen.
2. Maza se 1 - 2 minuti preplavi s kristalno vijolično.
3. Mazilo izperemo s počasi tekočo vodo iz pipe, da odstranimo odvečne madeže.
4. Grams jod nanesemo na razmaz 1 minuto.
5. Mazilo se spere s počasi tekočo vodo iz pipe
6. Maza se spere s 95% alkohola 2 do 5 sekund in se spere s počasi tekočo vodo iz pipe.
7. Mazilo je 1 minuto obarvano s safraninom
8. Mazilo se spere s počasi tekočo vodo iz pipe, posuši in opazuje pod mikroskopom.

Na koncu gramskega madeža bomo opazili gram negativne bakterije v roza barvi, grame pozitivne bakterije pa v vijolični barvi, kot je prikazano na sliki 02. Rezultat gramskega madeža je odvisen od debeline plasti peptidoglikana v njihovo celično steno. Med postopkom razbarvanja se primarni madeži in mešanica zlahka odstranijo iz gram negativnih bakterij in postanejo brezbarvni, saj imajo tanko plast peptidoglikana. Primarni madež se zadrži v gramih pozitivnih bakterij, saj imajo debelo peptidoglikansko plast. Proti madež ne bo učinkovit za gram pozitivne bakterije zaradi zadrževanja primarnega madeža. Torej bodo grami pozitivnih bakterij vidni v primarni barvi madežev, to je vijolični barvi. Proti madež bo obarval gram negativne bakterije in bo viden v barvi izbirnika, ki je barva safranina. Zato je težko razvrstiti bakterije v dve skupini glede na gramski madež in je dragocen pri diferenciaciji in identifikaciji bakterij..

Slika 2: sev Grama

Kaj je kultura?

Mikrobna kultura je metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijskih pogojih za različne namene. Kulture se gojijo v trdnih, poltrdnih in tekočih medijih glede na vrsto in namen gojenja mikroorganizmov. Kulture imajo mikroorganizme s potrebnimi hranili in rastnimi pogoji. Obstajajo različne sestavine gojišča, kot so energent, vir ogljika, dušik, minerali, mikrohranila, voda, strjevalna snov itd. Optimalno temperaturo, kisik in pH je treba prilagoditi glede na vrsto mikroorganizma, ki ga gojimo.

Obstajajo različne vrste mikrobnih kultur; na primer šaržna kultura, neprekinjena kultura, vbodna kultura, kultura plošč na agarju, kultura juhe itd. Glede na sestavo rastnega gojišča obstajajo različne vrste kulturnih medijev, znane kot sintetični, polsintetični in naravni medij. Mikrobne kulture se pripravijo v sterilnih pogojih znotraj posebne komore, imenovane laminarni pretok zraka. Gojišče in steklena posoda se sterilizirata pred inokulacijo želenega mikroorganizma. Pod ustreznimi sterilnimi pogoji se ciljni mikroorganizem prenese v steriliziran hranilni medij in inkubira pri optimalni temperaturi. Znotraj medija bo mikroorganizem rasl in se razmnoževal s pomočjo zagotovljenih hranil.

Slika 3: Bakterijska kultura na plošči

Kakšna je razlika med Gram Stain in kulturo?

Gram Stain vs kultura
Sev Grams je diferencialna tehnika obarvanja, ki se uporablja za bakterijsko diferenciacijo in identifikacijo.	Mikrobna kultura je metoda gojenja mikroorganizmov v laboratoriju.
Komponente
Pri tem se uporabljajo različni reagenti, vključno z dvema madežoma.	Pri tem se uporabljajo različni kulturi, kot so trdni, poltrdni in tekoči, sestavljeni iz hranil in drugih potrebnih pogojev.
Osnovne funkcije
To omogoča združevanje bakterij v dve skupini: gramov negativnih in gramov pozitivnih.	To omogoča razmnoževanje mikroorganizmov za različne namene.
Podnožje
Rezultat madežev po gramu temelji na razlikah v peptidoglikanski plasti celične stene.	V kulturnem mediju bodo mikroorganizmi rasli in se razmnoževali.
Izid
Grams negativne bakterije so vidne v roza barvi, gram pozitivne bakterije pa v vijolični barvi.	Na ploščah lahko vidimo kolonije mikroorganizmov. Na tekočih medijih so mikroorganizmi v suspendirani obliki.

Povzetek - Gram Stain vs kultura

Mikrobne kulture pripravljamo in vzdržujemo v laboratorijskih pogojih za različne namene, kot so skladiščenje, preskušanje, kemično čiščenje itd. Barvanje po Gramsu je postopek obarvanja, ki bakterije razlikuje v dve glavni skupini, imenovani grami negativnih bakterij in gram pozitivnih bakterij. Razlika med gramom in kulturo je torej v tem, da je gramsko obarvanje tehnika obarvanja bakterij, medtem ko je kultura metoda gojenja in vzdrževanja mikroorganizmov v laboratorijih.

Referenca:
1. Aryal, Sagar. "Obarvanje z gramom: načelo, postopek, razlaga, primeri in animacija." Spletne opombe o mikrobiologiji. N.p., 20. septembra 2015. Splet. 01. mar 2017.
2. "Mikrobiološka kultura." Wikipedija. Wikimedia Foundation, 01. februar 2017. Splet. 01. mar 2017
3. Kumar, Sabarish. "Katere so osnovne tehnike mikrobne kulture?" Katere so osnovne tehnike mikrobne kulture? N.p., n.d. Splet. 01. mar 2017

Vljudnost slik:
1. "Gram-Cell-wall" Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
2. "Gram Strain" avtorja tambe Y - datoteka Y tambe (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
3. „Kultura antraksa“ avtorja ameriškega medicinskega raziskovalnega inštituta za nalezljive bolezni - (Public Domain) prek Commons Wikimedia