Razlika med gramskim madežem in hitro kislino

Ključna razlika - Gram madež proti kislini hitro
 

Bakterije so zelo majhni mikroorganizmi. So pregledni, njihovo odkrivanje pa je težko v življenjskih in nezahtevnih pogojih. Tako so za lažje odkrivanje bakterij razvite različne metode obarvanja. Obstajajo tri glavne vrste obarvanja: preprosto obarvanje, diferencialno obarvanje in strukturno obarvanje. Diferencialno obarvanje je tehnika, ki za ločevanje bakterij uporablja več madežev. Gramski madeži in hitro kislinsko obarvanje so najbolj priljubljeni kot diferencialni madeži. Barvanje po Gramu je različna tehnika obarvanja, ki bakterije loči v dve skupini, znani kot gram-pozitivne bakterije in gram-negativne bakterije. Hitro kislinski madež je diferencialni madež, ki se uporablja za identifikacijo organizmov, ki hitro delujejo na kislini, kot je Mycobacterium iz nekislinskih hitrih organizmov. To je ključna razlika med madežem po Gramu in madežem Acid Fast.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je Gram madež 
3. Kaj je kislina hitro?
4. Podobnosti med gramskim madežem in hitro kislino
5. Primerjava ob strani - tabela v obliki grama proti kislinam v obliki tabele
6. Povzetek

Kaj je Gram madež?

Barvanje po gramu je pomembna tehnika diferencialnega obarvanja, ki se uporablja za identifikacijo bakterij v mikrobiologiji. To tehniko je leta 1884 uvedel danski bakteriolog Hans Christian Gram. Barvanje po gramu razvršča bakterije v dve glavni skupini, imenovani gram pozitivni in gram negativni, ki sta zelo pomembni pri razvrščanju in identifikaciji bakterij. Mikrobiologi izvajajo obarvanje z gramom kot začetni korak pri karakterizaciji bakterij med študijem.

Bakterije so razvrščene na podlagi razlik v njihovi celični steni. Gram pozitivne bakterije so sestavljene iz debele peptidoglikanske plasti v njihovi celični steni, medtem ko so gram negativne bakterije sestavljene iz tanke peptidoglikanske plasti v njihovi celični steni. Rezultat obarvanja z gramom bo temeljil na razliki v debelini peptidoglikanske plasti celične stene.

Obarvanje zrn se izvaja s štirimi različnimi reagenti, in sicer; primarni madež, mordant, sredstvo za razbarvanje in proti madežem. Kristalna vijolična barva in safranin se uporabljata kot primarni in proti madežem, grami joda in 95% alkohola pa se uporabljajo kot mordant in razbarvalec. Osnovni koraki madežev v gramih so naslednji;

1. Na čisti stekleni drsnik pripravimo bakterijski razmaz, toplotno pritrjen in ohlajen.
2. Maza se 1 - 2 minuti preplavi s kristalno vijolično.
3. Mazilo izperemo s počasi tekočo vodo iz pipe, da odstranimo odvečne madeže.
4. Grams jod nanesemo na razmaz 1 minuto.
5. Mazilo se spere s počasi tekočo vodo iz pipe
6. Maza se spere s 95% alkohola 2 do 5 sekund in se spere s počasi tekočo vodo iz pipe.
7. Mazilo je 1 minuto obarvano s safraninom
8. Mazilo se spere s počasi tekočo vodo iz pipe, posuši in opazuje pod mikroskopom.

Na koncu gramskega madeža bomo opazili gram negativne bakterije v roza barvi, grame pozitivne bakterije pa v vijolični barvi.

Slika 01: Gram negativne in grampozitivne bakterije

O izidu madežev v gramih odloča debelina peptidoglikanske plasti v njihovi celični steni. Med postopkom razbarvanja se primarni madeži in mešanica zlahka odstranijo iz gram negativnih bakterij in postanejo brezbarvni, saj imajo tanko plast peptidoglikana. Primarni madež se zadrži v gram pozitivnih bakterijah, saj imajo debelo peptidoglikansko plast. Proti madež ne bo učinkovit za gram pozitivne bakterije zaradi zadrževanja primarnega madeža. Tako bodo grami pozitivnih bakterij vidni v primarni barvi madežev, to je vijolični barvi. Proti madež bo obarval gram negativne bakterije, vidne pa bodo v barvi nabiranja, to je barva safranina. Zato je težko razvrstiti bakterije v dve skupini po gramskih madežih in je dragocena pri diferenciaciji in identifikaciji bakterij..

Kaj je kislina hitro??

Hitrost kisline je fizikalna lastnost nekaterih bakterij, zlasti njihova odpornost na razbarvanje s kislinami med postopki obarvanja. Ko se obarvajo, se organizmi upirajo postopkom razbarvanja na osnovi razredčene kisline in / ali etanola, ki so običajni v številnih protokolih obarvanja. Tako se tem organizmom poimenuje "kisli hitri". Ta lastnost se kaže, ker ima v celičnih stenah visoko vsebnost voskastega materiala (mikolične kisline). Ta test je ključnega pomena za identifikacijo Mycobacterium tuberculosis.

Slika 2: Mikobakterije s hitrimi kislinami

To kislinsko hitro obarvanje je razvil Paul Ehrlich leta 1882. Ehrlichovo tehniko hitre kisline je modificiral Ziehl-Neelsen in jo zdaj pogosteje uporabljajo. Postopek hitrega obarvanja s kislino vključuje tri različne reagente. Carbol fuschin se uporablja kot glavni madež. Kot sredstvo za razbarvanje se uporablja kisli alkohol. Metilen modra se uporablja kot proti madežem. Postopek obarvanja se izvede na naslednji način.

1. Primarni madež (karbolni fuksin) nanesemo na fiksni vzorec na diapozitivu (Vse celice bodo obarvane v rdečo barvo).
2. Drsnik segreva s paro 5 minut, kar madeže pravilno odpelje v celice.
3. Nato dodamo raztopino za razbarvanje (To odstrani rdeče barvilo iz vseh celic, razen kislin, ki so hitro hitreje).
4. Metilen modro je dodano kot proti madežu (Barva vse razbarvane bakterijske celice).
5. Kislinsko hitre bakterije ostanejo rdeče, medtem ko nesidne hitre bakterije obarvajo modro.

Kakšne so podobnosti med gramskim madežem in hitro kislino?

• Barvanje po gramu in kislina sta dve različni tehniki barvanja.
• Obe tehniki razvrščata bakterije v dve skupini.
• Obe tehniki uporabljata dve madeži in eno razbarvanje.

Kakšna je razlika med gramskim madežem in hitro kislino?

Gram madež proti kislini hitro
Barvanje po Gramu je različna tehnika obarvanja, ki bakterije loči v dve skupini Gram-pozitivnih bakterij in gram-negativnih bakterij.	Acid Fast madež je diferencialni madež, ki se uporablja za identifikacijo organizmov, ki so hitro kisli, od nekislinskih hitrih organizmov.
Primarni madež
Kristalna vijolična barva je najpogostejši primarni madež pri gramiranju.	Carbol fuksin je glavni madež, ki se hitro uporablja v kislini.
Sredstvo za razbarvanje
95% alkohola se uporablja kot sredstvo za razbarvanje barve v gramih.	Kislinski alkohol se hitro uporablja kot sredstvo za razbarvanje kisline.
Counter Stain
Gram madež uporablja safranin kot kontra madež.	Kislinsko hitro obarvanje uporablja metilen modro kot proti madež.
Opazovanje
Gram negativne bakterije opazimo v barvi izbranih barv, gram pozitivne bakterije pa v vijolični barvi.	Kislina Hitre bakterije opazimo v rdeči barvi, nekislinske hitre bakterije pa v modri barvi.

Povzetek - Gram Stain vs Acid Fast

Vizualizacija mikroorganizmov v živem stanju je težavna. Zato se za proučevanje njihovih lastnosti veliko uporabljajo biološki madeži in postopki obarvanja. Diferencialno obarvanje je ena vrsta tehnike obarvanja, ki se uporablja za razlikovanje bakterij. Barvno obarvanje in hitro kislinsko obarvanje sta dve različni tehniki barvanja. Barvanje po gramu razlikuje gram negativne bakterije in gram pozitivne bakterije na podlagi debeline njihovih celičnih sten. Kislinsko hitro obarvanje razlikuje kislinske hitre bakterije od nekislinskih hitrih bakterij glede na vsebnost mikolične kisline v celični steni. To je razlika med kislinskim hitrim in gramskim madežem.

Prenesite PDF različico Gram Stain vs Acid Fast

Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave, kot je navedeno v navodilu. Prosimo, da tukaj prenesete PDF različico Razlika med Gram madežem in Acid Fast.

Reference:

1. Aryal, Sagar. "Načelo, postopek, razlaga in primeri, hitro obarvanje kislin". Spletne opombe o mikrobiologiji. N.p., 8. maja 2017. Splet. Na voljo tukaj 20. julij 2017.
2. Diferencialni madeži za prepoznavanje bakterij: gram, kislina in endospor. N.p., n.d. Splet. Na voljo tukaj 20. julij 2017.

Vljudnost slik:

1. "Limfna vozla - atipična mikobakterijska okužba (MAI) - madež AFB" avtorja Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) prek Flickr
2. "Gram madein 01" avtor tambe Y - datoteka Y tambe (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia