Razlika med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA

The ključna razlika med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA je to konkurenčni ELISA uporablja inhibicijski antigen, medtem ko nekonkurenčen ELISA ne uporablja inhibicijskega antigena za test.

Encimski imunoorbentni test (ELISA) je imunološki test, ki zazna različne tarče, kot so protitelesa, antigeni, proteini in glikoproteini. To je hiter in preprost način izvedbe. Zato se pogosteje uporablja v raziskovalne in diagnostične namene. ELISA vključuje uporabo encimov in specifično vezavo protiteles in antigena. Glede na reakcije potekajo štiri vrste ELISA: neposredna ELISA, indirektna ELISA, sendvič ELISA in inhibicija ELISA. Neposredna, posredna in sendvič ELISA sta tipi nekonkurenčne ELISA, medtem ko je inhibicija ELISA vrsta komplementarne ELISA. Glavni cilj tega članka je razprava o razliki med konkurenčnim in nekonkurenčnim ELISA.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je konkurenčna ELISA
3. Kaj je nekonkurenčna ELISA
4. Podobnosti med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA
5. Primerjalna primerjava - konkurenčna in nekonkurenčna ELISA v tabeli
6. Povzetek

Kaj je konkurenčna ELISA?

Konkurenčna ELISA meri koncentracijo antigena v vzorcu z odkrivanjem motenj signala. Tukaj test uporablja inhibitorni antigen. Torej gre za vrsto inhibicije ELISA. Med tem postopkom antigeni, prisotni v vzorcu, tekmujejo z izbranim referenčnim antigenom za vezavo na določeno količino označenega protitelesa. Nadalje se ta postopek začne z inkubacijo vzorca z odvečno količino označenega protitelesa. Poleg tega je treba referenčni antigen predhodno nanesti na ploščico za večkratno testiranje. Nato je treba vzorčno zmes dodati na testno ploščo, ki vsebuje referenčni antigen. Prosta protitelesa se bodo vezala na referenčni antigen, odvisno od količine antigena v vzorcu. Če je torej več vzorčnega antigena, bomo odkrili manj referenčnega antigena. Tako ustvari šibkejši signal.

Slika 01: ELISA

Ko pa vzorec vsebuje manjšo količino antigena, bo vse več referenčnega antigena zasedlo protitelesa in dalo močan signal. Ker konkurenčni ELISA daje močnejši signal, ko vzorec vsebuje majhno količino antigenov, je konkurenčni ELISA zelo občutljiv test, tudi za vzorce z majhnim številom antigenov.

V nekaterih tekmovalnih kompletih ELISA se namesto označenega protitelesa uporablja označeni antigen. Tu se bosta označeni antigen in vzorčni antigen potegoval za vezavo na primarno protitelo. Podobno, ko je količina antigena v vzorcu majhna, bo količina označenega antigena, ki se veže na protitelesa, večja in ustvari močnejši signal.

Kaj je nekonkurenčna ELISA?

Med štirimi vrstami ELISA so tri vrste nekonkurenčna ELISA. So neposredna ELISA, indirektna ELISA in sendvič ELISA. Vsi trije formati delujejo po skupnem principu ELISA z majhnimi razlikami v njihovih metodologijah.

Neposredna ELISA uporablja primarno protitelo, označeno z encimom. Zato ne potrebuje sekundarnega protitelesa. Zato je neposredna ELISA hitrejša kot druge vrste ELISA. Primarno protitelo se bo neposredno vezivalo na imobilizirani ciljni antigen, ki je prisoten v plošči. Tako bo prišlo do encimsko-substratne reakcije, ki bo ustvarila vidni signal.

Slika 02: Sendvič ELISA

Za razliko od neposredne ELISA indirektna ELISA uporablja neoznačeno primarno protitelo in encim, označeno kot sekundarno protitelo. Ko se primarno protitelo veže na imobiliziran antigen, se sekundarno protitelo veže na primarno protitelo. Encim v sekundarnem protitelesu bo reagiral z antigenom in ustvaril viden signal. Sendvič ELISA se razlikuje tako od neposrednega kot s posrednim ELISA. Tu je protitelo imobilizirano na steno testne plošče.

Kakšne so podobnosti med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA?

• Konkurenčna in nekonkurenčna ELISA sta dve vrsti imunosorbentnih testov.
• So zelo prilagodljive in občutljive tehnike.
• Poleg tega sta konkurenčna in nekonkurenčna ELISA imunološka analiza, povezana z encimi.
• Obe metodi generirata signal zaradi reakcije encim-substrat.

Kakšna je razlika med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA?

Konkurenčna ELISA je vrsta ELISA, ki se opira na dopolnitev med antigenom analita in označenim antigenom za omejeno količino specifičnega protitelesa. Po drugi strani pa nekonkurenčen antigen in referenčni antigen v nekonkurenčni ELISA ne obstaja. Tako je to ključna razlika med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA. Podobno je konkurenčna ELISA inhibicijska ELISA, medtem ko nekompetitivna ELISA ni inhibicijska ELISA. Torej, to je tudi razlika med konkurenčnim in nekonkurenčnim ELISA.

Poleg tega je konkurenčna ELISA primernejša za merjenje nizke količine zanimanja za antigen. Je občutljiva metoda. Po drugi strani pa nekonkurenčna ELISA ni odvisna od števila antigenov v vzorcu. Zato je to tudi razlika med konkurenčnim in nekonkurenčnim ELISA.

V nadaljevanju infografik je razvidna primerjava razlike med konkurenčnim in nekonkurenčnim ELISA.

Povzetek - Konkurenčna in nekonkurenčna ELISA

Konkurenčna in nekonkurenčna ELISA sta dve glavni vrsti ELISA ali imunsko-absorbcijskih testov, povezanih z encimi. Pri seštevanju razlike med konkurenčnim in nekompetitivnim ELISA se konkurenčni ELISA opira na konkurenco med antigenom, ki nas zanima, in referenčnim antigenom proti omejeni količini protiteles. Zato konkurenčni ELISA imenujemo tudi kot inhibicijo ELISA. Po drugi strani pa se nekonkurenčna ELISA ne zanaša na konkurenco med ciljnimi antigeni in referenčnimi antigeni. Za analit, ki ga zanima, uporablja presežek označenega specifičnega protitelesa. Tako je to ključna razlika med konkurenčno in nekonkurenčno ELISA. Neposredna ELISA, posredna ELISA in sendvič ELISA so tri glavne vrste nekonkurenčne ELISA.

Referenca:

1. Bio-Rad. „Vrste ELISA | Bio-Rad. " Bio, na voljo tukaj.
2. "Štiri vrste ELISA." Cusabio Life Science - vaš biološki znanstveni partner, na voljo tukaj.

Vljudnost slik:

"Elisa tipus" avtor Carolfv333 - Lastno delo (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
“Sendvič imunološki test, ELISA” avtor NickCT - Lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia