Razlika med CFU in MPN

Ključna razlika - CFU proti MPN
 

Enota za tvorbo kolonije (CFU) in Najverjetnejše število (MPN) sta dve metodi za štetje mikroorganizmov v vzorcih. Oba parametra se uporabljata za zaznavanje kakovosti vode in bakterij fekalnih indikatorjev v vzorcih vode. Enota za tvorbo kolonije je ukrep, ki se uporablja za naštevanje števila sposobnih bakterijskih celic ali glivičnih celic v določeni prostornini ali masi danega vzorca. Standardna enota za ta parameter je CFU / ml ali CFU / g. Najverjetnejša številka je druga enota, ki se uporablja za merjenje števila sposobnih bakterijskih celic v tekočem vzorcu. Ključna razlika med CFU in MPN je v tem CFU se izračuna iz bakterijskih in glivičnih kolonij, ki rastejo na plošči s trdnim agarjem medtem MPN se izračuna iz sposobnih bakterij, ki rastejo v tekočem mediju.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je CFU 
3. Kaj je MPN
4. Primerjava ob strani - CFU proti MPN v tabeli
5. Povzetek

Kaj je CFU?

Enota za oblikovanje kolonije (CFU) je parameter, ki meri število sposobnih bakterijskih ali glivičnih celic v danem vzorcu. Omenjena je metoda, ki šteje enote, ki tvorijo kolonije standardno število plošč. Živahne kolonije, ki se pojavijo na agar ploščah, so izražene kot CFU na 1 ml (enota, ki tvori kolonijo na mililiter) vzorca za tekočine, ali CFU na 1 g (enota, ki tvori kolonijo na en gram) vzorca za trdne snovi.

Obstajata dve skupni metodi za merjenje CFU v vzorcu. So metoda širjenja plošče in metoda nalivanja plošč. Ti dve metodi sta podprti s tehniko, imenovano serijsko redčenje. Serično razredčeni vzorci omogočajo pridobivanje štetnega števila kolonij na površini agarja. Znan volumen vzorca se lahko razširi na površino agar plošče ali meša z agarjem in prelije na ploščo. Plošča se nato inkubira in štejejo nastale kolonije. Število kolonij se nanaša na število mikroorganizmov v prvotnem vzorcu. Plošče, ki prikazujejo preveč kolonij ali premalo kolonij, so izključene iz štetja, ker rezultati na teh ploščah morda niso statistično natančni. Statistično je najboljši razpon 30 - 300 kolonij na ploščici agarja. Zato je treba za natančno naštevanje izbrati pravilne tablice. Za zgornjo funkcijo se izvede serijsko redčenje.

Ko preštejete število sposobnih kolonij na ploščah, lahko CFU / ml izračunamo z naslednjo enačbo.

CFU na ml prvotnega vzorca = število kolonij na ploščici X faktorja redčenja

Faktor redčenja = (1 / redčenje plošče)

Če na primer dobite 149 kolonij na plošči 10^-4 razredčitev, nato pa lahko število bakterij v 1 ml prvotnega vzorca izračunamo na naslednji način:

CFU / ml = (149) x (1/10)^-4)

= 149 × 10⁴ ali 1490000

= 1. 49 x 10⁶

Slika 01: Enota za oblikovanje kolonije

Kaj je MPN?

The najbolj verjetno število je alternativni ukrep za CFU / ml. MPN ocenjuje tudi sposobne preživeti celice v tekočem vzorcu. Šteje organizme, ki rastejo v tekoči kulturi in je pretežno bakteriološka tehnika. Ta metoda je še posebej uporabna za vzorce, ki vsebujejo nizke koncentracije bakterijskih celic; na primer mleko, pitna voda itd. Vrednost MPN je izražena za 100 ml prostornine. MPN se opira na statistično metodo, ki temelji na teoriji verjetnosti. Obstajajo statistične tabele, namenjene iskanju vrednosti MPN na 100 ml vzorca. V teh tabelah so prikazani rezultati s 95-odstotnimi mejami zaupanja.

Vrednost MPN se izračuna po izvedbi tehnike, imenovane metode večkratne fermentacije v epruveti. Tri skupine epruvet, ki vsebujejo primeren medij za gojenje, inokuliramo s tremi različnimi volumni vzorca, kot so 10 ml, 1 ml in 0,1 ml, in inkubiramo za rast. Po inkubacijskem obdobju se epruvete ocenijo s + (pozitivno) ali - (negativno) za prisotnost ali odsotnost rasti. Vzorec pozitivnih in negativnih rezultatov se nato primerja s MPN tabelo statističnih verjetnosti za oceno števila mikroorganizmov. Nato se poda vrednost MPN za 100 ml vzorca. MPN se pogosto uporablja za odkrivanje koliformnih bakterij, ki so prisotne v vzorcih vode.

Slika 02: Tabela MPN

Kakšna je razlika med CFU in MPN?

CFU proti MPN
CFU je ukrep, ki se uporablja za izražanje števila sposobnih bakterijskih ali glivičnih kolonij v danem vzorcu.	MPN je alternativni ukrep CFU in meri število sposobnih bakterijskih celic v tekočem vzorcu.
Enota
CFU / ml ali CFU / g	MPN / 100 ml
Izračun
CFU se izračuna tako, da se izračuna število kolonij, gojenih na ploščah z agarji.	MPN izračunamo tako, da primerjamo pozitivne in negativne vzorce cevi s statistično tabelo MPN.
Tehnika serijskega redčenja
Pred nalaganjem vzorcev na ploščice z agarji izvedemo serijsko redčenje.	Serijsko redčenje se običajno ne izračuna, če se izračuna MPN
Metode
Metoda razprševanja plošče in metoda nalivanja plošče sta dve vrsti metod za pridobitev CFU.	Fermentacija z več cevmi je metoda za pridobitev vrednosti MPN.

Povzetek - CFU proti MPN

Merjenje rasti mikrobov je potrebno iz več razlogov. V obratih za predelavo hrane je treba izmeriti raven in vrsto mikroorganizmov v hrani. V prehrambeni industriji in medicini je treba zagotoviti učinkovito uporabo postopkov sterilizacije. V čistilnih napravah je potrebno redno šteti število mikrobov. Pri optimizaciji postopka v molekularni biologiji je potrebno izmeriti število kolonij na ploščah. Zato so na voljo različne metode štetja in merjenja rasti. CFU in MPN sta dve taki metodi, ki se široko uporabljata na različnih področjih. CFU je merilo števila sposobnih bakterijskih in glivičnih kolonij v danem vzorcu. Izračuna se z uporabo standardne metode štetja plošč ali metode preživetja plošč. MPN je še en ukrep, ki izraža število bakterijskih celic v danem volumnu tekočega vzorca. Izračuna se po metodi fermentacije z več cevk in tabeli MPN. To je razlika med CFU in MPN.

Prenesite PDF različico CFU proti MPN

Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave v skladu z navedbami. Prosimo, naložite PDF različico tukaj Razlika med CFU in MPN.

Reference:

"Enota za oblikovanje kolonij." Wikipedija. Wikimedia Foundation, 28. maj 2017. Splet. Na voljo tukaj 01. junij 2017.
"Mikrobiologija - 014 - Najverjetnejša številka." Mikrobiologija - 014 - Najverjetnejše število | Dodiplomski program mikrobiologija. N.p., n.d. Splet. Na voljo tukaj 01. junij 2017.

Vljudnost slik:

1. " Ročno štetje CFU “avtor Quentin Geissmann - Lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
2. »OSC Microbio 00 EE MPNTable« avtor CNX OpenStax - (CC BY 4.0) prek Commons Wikimedia