Razlika med testom Bradford in Lowry Protein

The ključna razlika med bradfordskim in nizkoproteinskim testom je to Bradford test beljakovin temelji na premiku absorbance barvila Coomassie briljantno modrega G-250, medtem ko test Lowry proteina temelji na reakciji ionov bakra (Cu +), ki nastanejo z oksidacijo peptidnih vezi z reagentom Folin-Ciocalteu.

Test je analitična tehnika, ki pomaga opredeliti glavne funkcionalne sestavine vzorca. Torej bi lahko bil test kvalitativni ali kvantitativni test. Na mnogih področjih, vključno z laboratorijsko medicino, farmakologijo, okoljsko biologijo, molekularno biologijo, biokemijo in imunologijo, se tovrstni testi uporabljajo rutinsko. Bradford in Lowry test proteinov sta dva biokemična testa, ki določata koncentracijo beljakovin v vzorčni raztopini. Oba preskusa uporabljata kolorimetrične tehnike za zagotavljanje rezultatov.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je Bradford protein protein
3. Kaj je test z nizkim proteinom
4. Podobnosti med testom Bradford in Lowry Protein
5. Primerjalna primerjava - Bradford vs Lowry Protein Test v tabeli
6. Povzetek

Kaj je Bradford Protein Test?

Bradford test beljakovin je hiter spektroskopski analitični postopek za analizo beljakovin. Pokaže visoko natančnost pri merjenju koncentracije beljakovin v raztopini. Marion Bradford je ta postopek predstavila leta 1976. V tem testu celotna reakcija temelji na sestavi aminokislin izmerjenih beljakovin. Z drugimi besedami, Bradford protein protein je kolorimetrični test. Uporablja barvilo Coomassie briljantno modro. Zato je ta kolorimetrični preskus proteinov odvisen od premika absorbance barvila. Coomassie briljantno modra G-250 obstaja v treh formatih: kationski (rdeči), anionski (modri) in nevtralni (zeleni). Med kislimi pogoji se rdeča barva pretvori v modro. Potrjuje vezavo proteina. Če beljakovin ni, lahko raztopina ostane v rjavi barvi.

Slika 01: Bradford test beljakovin

Bradford test beljakovin se razlikuje od drugih testov na beljakovine, saj je manj dovzeten za motnje različnih kemičnih spojin, ki so prisotne v beljakovinski raztopini. Te spojine vključujejo natrij, kalij, glukozo in saharozo itd.

Kaj je preskus nizkega proteina?

Test nizkih beljakovin je biokemični test, ki se uporablja za določanje skupne ravni beljakovin v raztopini. Oliver H. Lowry je oseba, ki je ta reagent razvila leta 1940. Postopek prikazuje skupno koncentracijo raztopine beljakovin z barvno spremembo, ki je sorazmerna koncentraciji beljakovin v raztopini. To je tudi kolorimetrični protein.

Reakcija med bakrovimi ioni (Cu +), ki nastane z oksidacijo peptidnih vezi in reagentom Folin-Ciocalteu, je osnova tega postopka. Prav tako ta reagent vsebuje fosfomolibdinsko kislino in fosfor-tungstično kislino. Vendar reakcijski mehanizem Lowry proteinske analize ni dobro razumljen. Vključuje pa oksidacijo ostankov cisteina, triptofana in tirozina z zmanjšanjem reagenta Folin-Ciocalteu.

Slika 02: Test nizkega proteina

Ostanki cisteina prispevajo k absorbanci, ki jo opazimo pri testu Lowry proteina in reakcija ima za posledico sijajno modro molekulo; heteropolno molibden modro. Redukcija te molekule se meri z absorbanco pri 660nm. Zato koncentracija ostankov cisteina in triptofana, ki je zmanjšala reagent Folin-Ciocalteu, odtegne skupno koncentracijo beljakovin v raztopini.

Kakšne so podobnosti med testom Bradford in Lowry Protein?

• Bradford in Lowry proteinski testi določajo koncentracijo beljakovin v raztopini.
• Obe metodi sta kolourimetrični metodi.
• Tudi občutljivost obeh metod je velika.

Kakšna je razlika med testom Bradford in Lowry Protein?

Bradford in Lowry protein test sta dve vrsti testov, ki določata koncentracijo beljakovin v raztopini. Bradford test beljakovin temelji na premiku absorbcije barvila Coomassie briljantno modre barve G-250, medtem ko je test Lowry proteina odvisen od reakcije bakrovih ionov, ki nastanejo z oksidacijo peptidnih vezi, z reagentom Folin-Ciocalteu. Torej, to je ključna razlika med preskusom proteina Bradford in Lowry. Bradford test beljakovin potrebuje 15 minut, da ustvari rezultat, medtem ko Lowyev test beljakovin potrebuje 40-60 minut, da dosežemo rezultat. To je še ena razlika med testom Bradford in Lowry na beljakovine. Poleg tega je test Bradford proteinov odvisen od sestave aminokislin, medtem ko je test Lowry proteina delno odvisen od sestave aminokislin. To je tudi razlika med testom Bradford in Lowry za beljakovine.

V nadaljevanju inforaphic ponuja več podrobnosti o razliki med testom Bradford in Lowry protein.

Povzetek - Bradford vs Lowry Protein Assay

Test je analitična tehnika, ki se uporablja za označevanje glavnih funkcionalnih sestavin vzorca. Bradford in Lowry proteinski test sta dve vrsti proteinskih testov, ki delujeta v okviru kolorimetričnih tehnik. Tako Bradford kot Lowry proteinski test določata koncentracijo beljakovin v raztopini. Ključna razlika med testom Bradford in Lowry Protein je v kolorimetrični tehniki, ki jo uporabljajo. Bradford test za beljakovine uporablja briljantno modri G-250 Coomassie, medtem ko Lowry protein preskus uporablja ione bakra (Cu +) in reagent Folin-Ciocalteu. Poleg tega metoda Bradford daje hitrejše rezultate kot preskus z beljakovinami Lowry. Vendar sta obe metodi zelo občutljivi metodi, ki ju lahko motijo ​​različne snovi.

Referenca:

1. "Kanadski botanični časopis." Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, na voljo tukaj.
2. "Kemija testov na beljakovine." Thermo Fisher Scientific - ZDA, na voljo tukaj.

Vljudnost slik:

1. »Bradford protein test« avtorja Helito - Lastno delo (CC BY-SA 4.0) prek Commons Wikimedia