Razlika med transformacijo in transfekcijo

Transformacija vs Transfekcija
 

Transformacija in transfekcija sta dve preprosti tehniki, ki se uporabljata za vnašanje tujega gena v gostiteljsko celico. Vendar so te tehnike odvisne od vrste gostiteljskega ali vektorskega sistema.

Kaj je celična transformacija?

Transformacija je tehnika, ki se uporablja za vnos genov v celice kvasa in bakterij. Ta tehnika običajno povzroči dedne spremembe genov in tako je izražanje gena trajno. Bakterijsko transformacijo je prvič uvedel leta 1928 Frederick Griffith. Nato so v začetku sedemdesetih let to tehniko uporabljali v E. coli. V procesu preoblikovanja E. coli, celice namočimo v ledeno hladni raztopini CaCl₂. Ta korak naredi E.coli pristojne celice. Po tem se kompetentne celice pomešajo s plazmidno DNK in se 20-30 minut inkubirajo na ledu. Nato je podan kratek toplotni šok, da omogočimo prenos DNK v celico. Končno celice damo v hranilno juho in inkubiramo pri 37 ° C 60-90 min, da se vzpostavijo plazmidi. Ko so ti koraki uspešno zaključeni, lahko transformirane celice postavimo na primeren medij za razmnoževanje celic. Ker transformacija velja za neučinkovito tehniko, je ni mogoče uporabiti za pripravo bank klonov.

Kaj je celična transfekcija?

Transfekcija je metoda vnašanja tujega gena, običajno v celice sesalcev. Obstajata dva načina transfekcije; namreč prehodna transfekcija in stabilna transfekcija. Pri prehodni transfekciji je genska ekspresija na voljo za določen čas; tako sprememba gena povzroči začasno izražanje. Ta metoda transfekcije je preprosta in hitra; zato se lahko uporablja rutinsko. Ena od pomanjkljivosti prehodne transfekcije je težava uporabe za obsežne sisteme za sintezo beljakovin.

Med stabilno transfekcijo se ciljni gen integrira v genom gostiteljske celice in tako je ekspresija gena trajna, za razliko od prehodne transfekcije.

Kakšna je razlika med transformacijo in transfekcijo?

• Transformacija je vnos gena v prokariontsko celico (bakterijsko in kvasovko), medtem ko se transfekcija običajno imenuje vnos gena v celico sesalcev.

• Transformacija povzroči dedno spremembo v genih, medtem ko lahko transfekcija povzroči začasno izražanje ali trajne spremembe genov.