Večina raziskovalnih raziskav vključuje gojenje živalskih celic, zato te študije zahtevajo vzdrževanje linij živalskih celic pod posebnimi rastnimi pogoji. Gojenje živalskih celic se široko izvaja v farmakoloških študijah za prepoznavanje presnove zdravil, diagnostike bolezni in raziskav raka. Medij celične kulture je pomemben vidik živalske celične kulture. Dulbeccov Modificiran orel (DMEM) in Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) sta dva gojišča, ki se uporabljata pri gojenju živalskih celic. RPMI je medij, ki se široko uporablja za gojenje celic sesalcev v suspenzijski kulturi. DMEM je spremenjen tip bazalnega medija s povečanimi koncentracijami aminokislin in vitaminov do štirikrat. DMEM se uporablja pri gojenju celic v adherentnih kulturah. Ključna razlika med obema medijema je vrsta kulture medijev. RPMI se uporablja na kulturah suspenzije, medtem ko se DMEM uporablja za kulturo adherentnih celic.
1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je RPMI
3. Kaj je DMEM
4. Podobnosti RPMI in DMEM
5. Primerjava ob strani - RPMI proti DMEM v tabeli
6. Povzetek
RPMI ali Roswell Park Memorial Institute Medium se omenja tudi RPMI 1640. Ime medija je izšlo po inštitutu, v katerem so mediji odkrili. Ta medij se pogosto uporablja v živalskih celičnih kulturah, zlasti za rast celic sesalcev. Prvotno so bili razviti za gojenje človeških limfocitov.
V RPMI so vključene naslednje sestavine:.
Posebnost RPMI je povečana koncentracija fosfata v mediju. RPMI se uporablja v atmosferi 5% ogljikovega dioksida. To bo zagotovilo največje in optimalne pogoje za rast celic. PH bazalnega medija vzdržuje 8,0 s puferskim sistemom bikarbonata.
Slika 01: Celična kultura na Petrijevi posodi
Dulbeccov Modified Eagle’s Medium (DMEM) je modificiran medij, ki se komercialno pripravi. Prvotna tekstura srednjega prahu je rumena. V DMEM se koncentracija vitamina poveča do štirikrat, s čimer se poveča vsebnost hranil v mediju.
DMEM je spremenjen tudi z dodajanjem več soli, kot so železov nitrat, natrijev piruvat in nekatere nebistvene aminokisline, kot sta serin in glicin. Spremenjena je tudi formulacija glukoze v medijih. Originalna formulacija je sestavljena iz 1000 mg / L glukoze, medtem ko se v DMEM koncentracija poveča do 4500 mg / L. DMEM zahteva tudi dopolnitev serumskega medija, saj ni popoln medij. Najpogosteje se DMEM dopolnjuje s fetalnim govejim serumom (FBS). FBS zagotavlja potrebne beljakovine in rastne dejavnike za proces kultiviranja.
PH medija se spreminja po dodatku natrijevega bikarbonata. Pred dodajanjem natrijevega bikarbonata je pH medija približno 6,80 - 7,40, pH po dodajanju natrijevega bikarbonata pa v območju od 7,60 do 8,20. Temperatura skladiščenja medija je 2 - 8 0C.
Slika 02: DMEM
RPMI proti DMEM | |
RPMI je medij, ki se široko uporablja za gojenje celic sesalcev v kulturi suspenzije. | DMEM je modificiran tip bazalnega medija s povečanimi aminokislinami in koncentracijami vitaminov. |
Prisotnost dodatnih fosfatov | |
Prisotna v RPMI. | Odsoten v DMEM. |
Uporaba | |
| Uporablja se za gojenje celic v adherentnih kulturah. Navajen je,
|
Vrste kulture | |
RPMI se uporablja za kulture suspenzije. | DMEM se uporablja za kulture s celičnimi lepljenimi. |
RPMI in DMEM se pogosto uporabljata pri gojenju živalskih celic, zlasti za gojenje živalskih celičnih linij, vključno z limfociti in vitro. DMEM je spremenjen bazalni medij, kjer je povečana koncentracija hranil. RPMI, ki ga je razvil Roswell Park Memorial Institute, je tudi medij, ki se uporablja pri gojenju živalskih celic, posebej za limfocite sesalcev. Oba medija sta komercialno na voljo. To je razlika med RPMI in DMEM.
1. »Mediji RPMI - Mediji RPMI-1640.« Sigma-Aldrich. Na voljo tukaj
2. "Dulbeccova Modificirana orlova sredina - DME, DMEM." Sigma-Aldrich. Na voljo tukaj
1.'Cell Culture in a Petri dis'By kaibara87 - prvotno objavljen na Flickr kot Cell Culture, (CC BY 2.0) prek Commons Wikimedia
2.'DMEM medij za celične kulture 'Lilly_M - lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia