Razlika med povratno in normalno fazo HPLC

The ključna razlika med reverzno fazo in normalno fazo HPLC je, da je HPLC z reverzno fazo uporablja polarno stacionarno fazo in manj polarno mobilno fazo, medtem ko običajna faza HPLC uporablja nepolarno stacionarno fazo in polarno mobilno fazo.

Normalna faza HPLC je najstarejša tehnika HPLC, ki jo je Tswett uporabljal pri svojih odvajanjih rastlinskih ekstraktov; v steklenem stebru je uporabil kredo. To je bil klasični način kromatografije, ki ga je poimenoval kot "normalno" tehniko. Po drugi strani je HPLC s obratno fazo nasprotje običajne tehnike, ki so jo znanstveniki razvili v zadnjem času.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je obratno fazna HPLC
3. Kaj je normalno fazna HPLC
4. Primerjava ob strani - HPLC s povratno fazo in normalno fazo v tabeli
5. Povzetek

Kaj je obratna faza HPLC?

HPLC z reverzno fazo je kromatografska tehnika, pri kateri uporabljamo hidrofobno stacionarno fazo. Med vsemi HPLC metodami uporabljamo to metodo približno 70% zaradi njene široke uporabnosti in obnovljivosti. Stacionarna faza je nepolarna, mobilna faza pa polarna.

Znanstveniki večinoma uporabljajo vodno mešanico vode z mešajočim se polarnim organskim topilom, kot sta acetonitril ali metanol kot mobilna faza. Zato analiti medsebojno delujejo z nepolarno stacionarno fazo.

Kaj je normalno fazna HPLC?

Normalna faza HPLC je kromatografska tehnika, pri kateri uporabljamo hidrofilno stacionarno fazo. Je tradicionalna metoda HPLC, čeprav je ne uporabljamo tako veliko. Stacionarna faza je polarna, mobilna faza pa nepolarna. Še pomembneje je, da je mobilna faza te tehnike 100% organska. Pomeni, da se za to ne uporablja voda.

Slika 01: Profil vzorca za normalne fazne in obratnofazne kromatograme HPLC glede na polarnost komponent v analitu.

Običajno stacionarna faza vsebuje kremen, ciano, diol, amino vezane faze itd. Mobilne faze vključujejo organska topila, kot so heksan, etil acetat itd. Ta tehnika temelji na zadrževanju molekul topila ali analita na polarni stacionarni fazi.

Kakšna je razlika med povratno in normalno fazo HPLC?

HPLC z reverzno fazo je kromatografska tehnika, pri kateri uporabljamo hidrofobno stacionarno fazo. Stacionarna faza te tehnike je nepolarna. Stacionarna faza je nepolarna, mobilna faza pa polarna. Poleg tega znanstveniki uporabljajo vodno mešanico vode z mešljivim polarnim organskim topilom, kot sta acetonitril ali metanol kot mobilno fazo v obratni fazi HPLC. Medtem ko je običajna faza HPLC kromatografska tehnika, pri kateri uporabljamo hidrofilno stacionarno fazo. Stacionarna faza te tehnike je polarna. Stacionarna faza je polarna, mobilna faza pa nepolarna. Poleg tega znanstveniki uporabljajo organska topila, kot so heksan, etil acetat itd. Kot mobilno fazo običajne faze HPLC. Spodnja infografska slika prikazuje tabelarno razliko med reverzno fazo in normalno fazo HPLC.

Povzetek - HPLC z obratno fazo in normalno fazo

Tehnike HPLC z reverzno in normalno fazo sta dve tekočinsko kromatografski tehniki. Razlika med povratno in normalno fazno HPLC je, da HPLC z reverzno fazo uporablja polarno stacionarno fazo in manj polarno mobilno fazo, medtem ko HPLC z normalno fazo uporablja nepolarno stacionarno fazo in polarno mobilno fazo.

Referenca:

1. Vode. "Načini ločevanja HPLC." HPLC - Pojasnjena visokozmogljiva tekočinska kromatografija: vode. Na voljo tukaj