The ključna razlika med mikrotomom in ultramikrotomijo je to tanke rezine vzorcev, pridobljenih iz mikrometoma, lahko opazujemo bodisi s svetlobno mikroskopijo bodisi z elektronsko mikroskopijo, medtem ko lahko izjemno tanke rezine vzorcev, pridobljenih iz ultramikrotomije, opazimo z elektronsko mikroskopijo.
Priprava vzorca je vitalna tehnika pri mikroskopiji. Priprava tkiv za mikroskopijo poteka predvsem z rezanjem zelo tankih rezin. Obstajajo različne tehnike za rezanje kosov osebkov. Microtome je kos opreme, ki reže zelo tanke rezine. Ultramikrotomija je vrsta mikrotoma, ki reže izjemno tanke rezine rastlinskih in živalskih tkiv. Izbira tehnike je odvisna od tega, kako tanek mora biti vzorec za opazovanje.
1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je mikrotom
3. Kaj je ultramikrotomija
4. Podobnosti med mikrotomom in ultramikrotomijo
5. Primerjava ob strani - Microtome vs Ultramicrotomy v tabeli
6. Povzetek
Mikrotom je orodje, ki razreže tanke rezine vzorcev za mikroskopijo. Pomagajo predvsem pri rezanju vzorcev tkiv in organov iz organizmov, ki jih je mogoče opazovati pod mikroskopom. Zato je mikrotom pomemben v postopku priprave vzorca. Primerke je mogoče opazovati z mikrotomom s pomočjo svetlobne mikroskopije ali elektronske mikroskopije. Mikrotomija razreže materiale na zelo tanke rezine, od 50 nanometrov do 100 mikrometrov debeline.
Slika 01: Mikrotom
Mikrotom uporablja različna orodja za rezanje tankih delov materiala. Vrsta orodja je odvisna od vrste materiala. Rezila za rezanje so izdelana iz jekla, stekla ali diamanta. Izbira orodja je odvisna tudi od debeline vzorca, ki je potrebna za nadaljnje postopke. Jeklena rezila razrežejo rastlinska in živalska tkiva za histološka opazovanja s svetlobnim mikroskopom. Stekleni rezili rezujejo tanke odseke za elektronsko mikroskopijo. Diamantna rezila so najbolj vsestranska vrsta. Rezuje trde snovi, kot so zobje in kostne snovi, tako za svetlobo kot elektronsko mikroskopijo. Poleg tega so diamantna rezila uporabna pri rezanju draguljev.
Ultramikrotomija je veja mikrotomije. Tehnika razreže vzorce na izjemno tanke odseke, ki jih je mogoče prepoznati le z elektronsko mikroskopijo. Poleg tega prenosna elektronska mikroskopija olajša opazovanje vzorcev, ki izhajajo iz ultramikrotomije. Običajno priprava biološkega vzorca poteka z ultramikrotomijo. Vendar pa lahko ultramikrosomije opravijo tudi kovinski in plastični vzorci.
Slika 02: Krio-ultramikrotom
Ultramikrotomija olajša pripravo vzorcev, ki se razlikujejo po debelini od 50 nanometrov do 100 nanometrov. V bistvu uporablja diamantni nož. Poleg tega moramo pred postopkom rezanja pregledati vzorec iz elektronskega mikroskopa. Pred rezanjem moramo označiti območje za rezanje. Vzorci, narezani z ultramikrotomijo, so nameščeni na kovinske kroglice za opazovanje in nadaljnjo obdelavo. Možno je tudi zamrzniti te primerke za nadaljnjo uporabo. Tehnika je zapletena in draga v primerjavi s tehniko mikrotomije.
Ultramikrotomija je pododdelek mikrotomije, ki je tehnika spajanja materialov za mikroskopijo. Ključna razlika med mikrotomijo in ultramikrotomijo se nanaša na vrsto mikroskopije, ki jo uporabljajo za opazovanje vzorca. Rezine je mogoče opazovati iz mikrotomeja tako s svetlobo kot elektronsko mikroskopijo; vendar lahko z elektronsko mikroskopijo opazujemo le rezine, ki izhajajo iz ultramikrotomije.
Poleg tega se vrste rezila, ki se uporabljajo v obeh tehnikah, tudi razlikujejo. Microtome uporablja jeklene, steklene ali diamantne rezila, medtem ko ultramikrotomija uporablja diamantna in steklena rezila. Tako je tudi razlika med mikrotomom in ultramikrotomijo. Poleg tega je nadaljnja razlika med mikrotomom in ultramikrotomijo v tem, da medtem ko mikrotomija reže tanke odseke, ultramikromotomija izrezuje izjemno tanke odseke vzorcev.
Ključna razlika med mikrotomom in ultramikrotomijo je njihova sposobnost rezanja različnih narezanih primerkov. V zvezi s tem mikrotom reže tanke rezine v velikosti od 50 nanometrov do 100 mikrometrov, medtem ko vzorci ultramikrotomskih rezin od 50 do 100 nanometrov. Tako je mogoče opazovati rezine, pridobljene iz mikrotomola tako s svetlobo kot elektronsko mikroskopijo; vendar lahko z elektronsko mikroskopijo opazujemo le rezine, ki izhajajo iz ultramikrotomije.
1. Newman, Sanford B. NAPREDKI IN VLOGE ULTRAMIKROTOMIJE. ProQuest LLC (2015), na voljo tukaj.
1. "Obdelava tkiv - Microtome se uporablja za rezanje traku 5-mikronskih debelin od parafinskega bloka" Ed Uthman - prvotno objavljen na Flickr kot Tissue Processing 09.jpg (CC BY-SA 2.0) prek Commons Wikimedia
2. "Cryo Ultramicrotome" avtorja MST - (brezplačna avtorska pravica) prek Commons Wikimedia