Razlika med hibridizacijo in situ in imunohistokemijo

Ključna razlika - hibridizacija na mestu in imunohistokemija
 

Diagnostika raka in nalezljivih bolezni je priljubljen trend, v katerem se nove tehnike, ki temeljijo na proteomiki in genomiki, uporabljajo za prepoznavanje tumorjev ali infekcijskih celic, njegovo širjenje in mesta celičnega razvoja ter analizo genetske osnove najbolj nalezljivih in nenalezljivih bolezni. To bo povzročilo natančno obdelavo in oblikovanje zdravil ter razvoj prilagojenih terapij za bolezni. Hibridizacija in situ (ISH) in imunohistokemija (IHC) sta dve tako široko uporabljeni tehniki v biologiji raka, ključna razlika med hibridizacijo in situ in imunokemijo pa je v molekulah, ki se uporabljajo v postopku analize. V ISH se za analizo uporabljajo sonde nukleinske kisline, medtem ko se pri IHC za diagnostične določitve uporabljajo monoklonska in poliklonska protitelesa..

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je hibridizacija v situaciji
3. Kaj je imunohistokemija
4. Podobnosti med hibridizacijo in situ in imunohistokemijo
5. Primerjalna primerjava - v hibridizaciji Situ proti imunohistokemiji v tabeli
6. Povzetek

Kaj je hibridizacija v situaciji (ISH)?

Hibridizacija in situ je tehnika hibridizacije nukleinske kisline, ki se neposredno izvaja na delu ali delu tkiva, v celotnem tkivu ali v celicah. Tehnika je odvisna od teorije komplementarnega osnovnega združevanja Watson Crick, ki ima za posledico bodisi hibride DNA-DNA bodisi hibride DNA-RNA, ki lahko zaznajo mutirane gene ali identificirajo zahtevani gen, ki nas zanima. Enovendne sekvence DNA, dvojno verižne DNK sekvence, enojne verige RNA ali sintetične oligonukleotidne sekvence se uporabljajo kot sonde med tehniko hibridizacije, te sonde pa so na 5 'koncu označene z radioaktivnim fosforjem za identifikacijske postopke po avtoradiografiji ali označene z uporabo fluorescentnih barvil . Na voljo so različne vrste ISH tehnik, ki temeljijo na vrsti uporabljene sonde in uporabljeni vrsti vizualizacijske tehnike.

Slika 01: Fluorescentna hibridizacija v situ

Obstaja veliko aplikacij ISH, predvsem pri molekularni diagnostiki nalezljivih bolezni, da bi ugotovili prisotnost patogenov in potrdili patogena z molekularno diagnostiko. Uporablja se tudi na področjih razvojne biologije, kariotipizacije in filogenetske analize ter fizičnega preslikavanja kromosomov.

Kaj je imunohistokemija (IHC)?

V tehniki IHC je glavna analizirana molekula antigen. Med IHC se monoklonska in poliklonska protitelesa uporabljajo za določitev prisotnosti antigenov ob okužbi ali statusu maligne celice proliferacije. Tehnika temelji na vezavi antigen-protitelo, za to tehniko pa se uporabljajo oznake encimov; ena taka uporaba je ELISA (test, povezan z enzimi, imunosorbent). Markerji so lahko tudi fluorescentna protitelesa ali radiooznačena protitelesa.

Slika 02: Imunohistokemija

IHC se pogosto uporablja za odkrivanje rakavih celic. Diagnostični postopki so usmerjeni proti antigenom, ki so prisotni na tumorskih celicah, da prepoznajo in karakterizirajo tumor. Isti postopek je uporabljen za diagnosticiranje povzročiteljev infekcij. Monoklonska in poliklonska protitelesa se uporabljajo tudi za analizo različnih genskih produktov tako, da omogočijo reakcijo vezave protitelo-antigen med želenim proteinom in sintetičnim protitelesom.

Kakšne so podobnosti med hibridizacijo in situ in imunohistokemijo?

• ISH in IHC sta zelo specifični reakciji.
• Obe tehniki sta zelo natančni.
• Obe tehniki se lahko uporabljata v diagnostiki za raka in nalezljive bolezni.
• Te tehnike izvajamo v sterilnih in vitro okoljih.
• Obe sta hitri tehniki, ki omogočata ponovljive rezultate.
• ISH in IHC uporabljata metode zaznavanja, kot so radio označevanje in fluorescenčne tehnike.

Kakšna je razlika med hibridizacijo in situ in imunohistokemijo?

In Situ Hybridization vs Imunohistochemistry
ISH je tehnika hibridizacije nukleinske kisline, ki se neposredno izvaja na delu ali delu tkiva ali celotnem tkivu.	IHC je tehnika, pri kateri se za določitev prisotnosti antigenov uporabljajo monoklonska in poliklonska protitelesa, ki so posebni proteinski markerji, nameščeni na celičnih površinah.
Vrsta analiziranih biolekul
ISH analizira nukleinske kisline.	IHC analizira beljakovine-antigene.
Osnove biokemijske reakcije
Pri tej tehniki se pojavi komplementarno seznanjanje baz med DNK-DNK ali DNK-RNK.	Interakcije antigen-protitelo so vključene v imunohistokemijo.
Encimsko povezane metode zaznavanja
Enhimskih metod odkrivanja ni mogoče uporabiti v ISH.	Encimske metode zaznavanja se lahko uporabljajo v IHC.

Povzetek - hibridizacija v položaju in imunohistokemija

Molekularna diagnostika je hitra in potrjujoča metoda, ki jo je mogoče uporabiti za prepoznavanje nenalezljive bolezni, kot sta rak ali nalezljiva bolezen, kot je HIV ali tuberkuloza, na podlagi molekulskih markerjev, ki so prisotni na celicah, ki vodijo v manifestacijo bolezni. Molekularni markerji so lahko prisotni v obliki izraženih beljakovin ali na genetski ravni, na podlagi katerih se uvajajo različne nove tehnike za povečanje učinkovitosti in so manj naporne, čeprav so pri teh tehnikah visoki stroški. Tako je ISH odvisen od hibridne tvorbe DNA-DNA ali DNA-RNA, IHC pa je odvisen od specifičnih reakcij med protitelesom in antigenom. To je razlika med hibridizacijo in situ.

Prenesite PDF različico hibridizacije In Situ v primerjavi z imunohistokemijo

Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave, kot je navedeno v navodilu. Prosimo, prenesite PDF različico tukaj Razlika med hibridizacijo in situacijo in imunohistokemijo.

Reference:

1. Duraiyan, Jeyapradha idr. "Uporaba imunohistokemije." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, avgust 2012, na voljo tukaj. Dostopno 24. avgusta 2017.
2. "In situ hibridizacija (ISH)." Nacionalni center za informacije o biotehnologiji, ameriška nacionalna medicinska knjižnica, na voljo tukaj. Dostopno 24. avgusta 2017.

Vljudnost slik:

1. "RIBE (fluorescentna hibridizacija v situ)" avtor MrMatze - Lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
2. "Imunohistochemicalstaining2" avtor Imoen z angleškega Wikipedije (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia