Razlika med HPLC in Fast HPLC

The ključna razlika med HPLC in hitro HPLC je to tlak črpalke, ki ga uporabljamo za HPLC, je približno 40 MPa, tlak črpalke za hiter HPLC pa je približno 3-5 MPa.

Najpogostejša tehnika, ki jo uporabljamo za ločevanje komponent mešanice, je "tekoča kromatografija". Za dosego tega cilja obstaja več tehnik, med katerimi je zelo priljubljena HPLC. HPLC pomeni visoko zmogljivo tekočinsko kromatografijo, ki hitro in učinkovito identificira, količinsko opredeli in loči sestavine tekoče zmesi. Fast HPLC je posebna aplikacija HPLC, ki je pozno pritegnila pozornost tistih, ki sodelujejo pri preučevanju rešitev.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je HPLC
3. Kaj je hitra HPLC
4. Primerjava ob strani - HPLC proti hitri HPLC v tabeli
5. Povzetek

Kaj je HPLC?

HPLC je visokozmogljiva tekočinska kromatografija. Uporablja visok tlak za potiskanje topil, tako da prehajajo skozi kolono. Prav tako je idealen način za ločevanje in proučevanje različnih spojin, kot so aminokisline, nukleinske kisline, ogljikovi hidrati, steroidi, antibiotiki in ogljikovodiki. HPLC ima veliko prednosti pred drugimi metodami ločevanja zmesi, kot so višja ločljivost in hitrejša analiza. To odpravlja potrebo po ponovnem pakiranju in regeneraciji ter ponuja boljši nadzor nad parametri in s tem povečuje učinkovitost ločevanja. V idealnem primeru je HPLC primeren za velike aplikacije, saj lahko loči zelo majhne delce in omogoča uporabo visokih tlakov, ki olajšajo pretok topil.

Slika 01: Stolpec HPLC

Na kratko, metoda delovanja tehnike HPLC je naslednja. Najprej bi morali v črko vnesti vzorec v tok mobilne faze s pomočjo črpalke. Tlak črpalke je treba vzdrževati na 40 MPa. Ta tok mobilne faze prodira skozi kolono HPLC. Nato komponente v vzorcu preidejo tudi skozi stolpec. Vendar se njihove hitrosti gibanja med seboj razlikujejo zaradi razlike v interakcijah med komponentami vzorca in adsorbentom v stolpcu. Temu adsorbentu rečemo stacionarna faza, ker je znotraj stolpca (ne premika se). Nato na koncu stolpca lahko zberemo vzorec, ki eluira iz stolpca, s tem pa lahko sestavine v vzorcu zberemo ločeno.

Kaj je hitra HPLC?

Pred kratkim so raziskovalci znanstvenega inštituta Schering Plough razvili hitro tehniko HPLC, ki je napredna različica HPLC, saj omogoča še hitrejše ločevanje spojin iz zmesi. Tudi ta metoda, znana kot hitra HPLC, uporablja 2,7-kratne delce s kaljenim jedrom, ki nastanejo s spajanjem 0,5um poroznega silicijevega dioksida nad trdnim delcem kremena. Ti unikatno narejeni delci zelo hitro naredijo postopek ločevanja in tudi pri nizkem tlaku, kot ga uporabljamo pri HPLC.

Slika 02: Aparat FPLC

Hitri HPLC dosega rezultate, primerljive z UPLC, vendar znanstveniki menijo, da je ta tehnika vrhunska, saj ne potrebuje zelo drage opreme z ultra visokim tlakom. Super je, da hitri HPLC ne potrebuje novih laboratorijskih protokolov.

Kakšna je razlika med HPLC in Fast HPLC?

HPLC je tekočinska kromatografija visoke ločljivosti in hitra HPLC je napredna oblika tekoče kromatografije visoke ločljivosti. Ključna razlika med HPLC in hitro HPLC je, da je tlak črpalke, ki ga uporabljamo za HPLC, okoli 40 MPa. Medtem ko je tlak črpalke za hitro HPLC približno 3-5 MPa. Poleg tega lahko s tehniko HPLC ločimo različne spojine, kot so aminokisline, nukleinske kisline, ogljikovi hidrati, steroidi, antibiotiki in ogljikovodiki, medtem ko se hitra tehnika HPLC uporablja predvsem za ločevanje beljakovin.

Spodnja infografija prikazuje več informacij o razliki med HPLC in hitro HPLC.

Povzetek - HPLC proti hitri HPLC

HPLC je tehnika tekoče kromatografije, ki je postala zelo priljubljena po vsem svetu. Hitra HPLC je nova različica HPLC, znanstveniki na Inštitutu Schering Plough so razvili to novo tehniko. Ključna razlika med HPLC in hitrim HPLC je v tlaku črpalke, ki ga uporabljamo za ločevanje. To je; tlak črpalke, ki ga uporabljamo za HPLC, je približno 40 MPa. Toda tlak črpalke za hitro HPLC znaša približno 3-5 MPa.

Referenca:

1. "Visokozmogljiva tekočinska kromatografija." Wikipedia, Fundacija Wikimedia, 20. 10. 2018. Dostopno tukaj 
"Za zagon hitrega HPLC potrebujete domišljen sistem - ali pa?" Hiter HPLC - CHROMacademy. Na voljo tukaj  

Vljudnost slik:

1. "HPLC kolom" vrata Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) prek Commons Wikimedia  
2. "Lab's FPLC" avtorja Stephen Helms iz Dallasa, TX, Združene države Amerike - FPLC našega laboratorija (CC BY-SA 2.0) prek Commons Wikimedia