V okviru mikroskopije obarvanje velja za bistven korak med izboljšanjem kontrasta mikroskopske slike, zlasti za poudarjanje različnih struktur v bioloških tkivih. Med obarvanjem madežev periferne krvi in kostnega mozga se uporabljajo madeži Wright in Giemsa. Ti madeži so znani kot Romanowsky madeži. Obe madeži so sestavljeni iz pomembnih komponent: oksidiranega metilensko modrega, eozin Y in barvil azurno B. Funkcija metilen modre in azurne B je obarvanje jedra z barvami, ki se razlikujejo od modre do vijolične. Ti madeži se pogosto uporabljajo med preučevanjem morfologije rdečih krvnih celic in med izvajanjem diferencialnega števila belih krvnih celic. Diagnozo različnih bolezenskih stanj, kot je levkemija, je mogoče doseči s postopki obarvanja Romanowskega. Obarvanje z Wrightom se uporablja za razlikovanje krvnih celic, ki so sestavljene iz mešanice eozin in metilen modrih barvil. Obarvanje z giemso se uporablja pri obarvanju bakterijskih celic in človeških celic in jih je mogoče kombinirati z Wright madežem, da nastane madež Giemsa Wright. To je ključna razlika med madežem Giemsa in Wright.
Madež Giemsa se uporablja za citogenetiko in histopatološko diagnozo parazitov malarije in drugih parazitskih bolezni. Madež na Giemsi lahko štejemo tudi za osnovni madež pri razvrščanju limfomov v klasifikaciji Kiel. Giemsa madež je potreben za povezovanje Giemsa, ki je splošno znano kot G-bend. Giemsa trak se uporablja za obarvanje kromosomov in se uporablja tudi pri ustvarjanju kariogramov. Kromosomske nepravilnosti, kot so translokacije in preureditve, se prepoznajo s pasom Giemsa. Madež Giemsa se v histologiji uporablja zaradi kakovostnega obarvanja jedrske membrane in kromatina, metahromasije nekaterih celičnih komponent in različnih lastnosti citoplazemskega obarvanja glede na tip celice.
Slika 01: Giemsa madež
Raztopina zdravila Giemsa vsebuje metilen modro barvo, Azure B in eozin, madež pa se komercialno pripravi z uporabo praška Giemsa. Stabilnost madeža je odvisna od metilen azure in njegove mešanice, skupaj z metilen modro, ki tvori eozinat. Obarvanje giemse je posebno za fosfatne skupine v verigi DNA in se navezuje na področja, kjer je velika količina adeninsko-timinskih vezi. Pri metodi obarvanja Giemsa se tanka plast vzorca na začetku postavi na mikroskopsko drsnik skupaj z nekaj kapljicami čistega metanola za približno 30 sekund. Nato drsnik potopimo v 5% raztopino madežev Giemsa, ki jo pripravimo sveže, približno 20 - 30 minut. Na koncu se drsnik opere z vodo iz pipe in pusti, da se posuši. Madež Giemsa je znan kot diferencialni madež, ker se Wright-ov-Giemsa madež oblikuje, ko se Wright-ov madež kombinira z Giemsa. Zato ga lahko uporabimo pri preučevanju patogenih bakterij, vezanih na človeške celice. Tu se človeške celice in bakterijske celice obarvajo barvno, vijolično in roza barvo pa opazimo.
Wright madež je poimenovan po Jamesu Homerju Wrightu, ki je spremenil Romanowsky madež. Wright-ov madež se uporablja za razlikovanje vrst krvnih celic, saj pomaga razlikovati med vrstami krvnih celic. Posledično lahko okužbe diagnosticiramo z opazovanjem števila belih krvnih celic. Obarva mešanico eozina, ki je rdeče barve, in barv metilen modre barve. Wright madež uporablja za obarvanje in opazovanje vzorcev urina, razmazov periferne krvi in aspiratov kostnega mozga pod svetlobnimi mikroskopi. Wright madež se uporablja pri obarvanju kromosomov v citogenetiki za pospeševanje diagnoze več bolezni in sindromov. V vzorcih urina, obarvanih z Wrightovim madežem, se prepoznajo eozinofili, ki kažejo na okužbo sečnega trakta.
Slika 02: Wright madež
Pri postopku Wright's madež pripravimo zračno posušen krvni film in Wright madež nanesemo in pustimo 3 minute. Nato dodamo pufer z enako količino madeža, nežno premešamo in pustimo 5 minut. Drsnik drži vodoravno in ga dobro speremo z nevtralno destilirano vodo. Nazadnje se posuši in opazi pod mikroskopom.
Giemsa Stain proti Wright Stain | |
Madež Giemsa je različna tehnika obarvanja, ki se uporablja predvsem za obarvanje bakterijskih celic in tudi človeških celic. | Rright madež je različna tehnika obarvanja, ki se uporablja predvsem pri postopkih obarvanja raztopin krvi, vzorcev urina in aspiratov kostnega mozga. |
Obarvanje je bistvena laboratorijska tehnika, ki se uporablja med mikroskopijo, ki se uporablja za izboljšanje kontrasta mikroskopske slike. Barva Giemsa in Wright Stain, skupaj znana kot Romanowsky madeži, vključujeta izvajanje diferencialnega števila belih krvnih celic in proučevanje celične morfologije rdečih krvnih celic. Oksidirano metilen modro, barvila eozin Y in azurno B so pomembne sestavine Romanowskih madežev. V glavnem se madež Giemsa uporablja pri obarvanju bakterijskih celic, vendar se lahko uporablja tudi za človeške celice. Obarvanje z Wrightom se pogosto uporablja med obarvanjem krvnih madežev, vzorcev urina in aspiratov iz kostnega mozga. To je razlika med Giesma madežem in Wrightovim madežem.
Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave, kot je navedeno v navodilu. Prenesite PDF različico tukaj. Razlika med Giemsa Stain in Wright Stain
1. Barcia, J. J. "madež Giemsa: njegova zgodovina in aplikacije." Mednarodna revija o kirurški patologiji., Ameriška nacionalna medicinska knjižnica, julij 2007, dostopno tukaj. Dostopno 12. septembra 2017
2. Krafts, K P in S E Pambuccian. "Obarvanje Romanowskega v citopatologiji: zgodovina, prednosti in omejitve." Biotehnika in histokemija: uradna publikacija Komisije za biološke madeže., Nacionalna medicinska knjižnica ZDA, april 2011, dostopna tukaj. Dostopno 12. septembra 2017
1. "Tripanosoma-evansi-podgana-krv-Giemsa-madež" avtor Alan R Walker - lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
2. "Mastna celica, aspirat kostnega mozga, Wright Stain (5916735712)" Ed Uthman iz Houstona, TX, ZDA - Mast Cell, Aspirate iz kostnega mozga, Wright StainPrebavljeno s CFCF (CC BY 2.0) prek Commons Wikimedia