Razlika med gensko ojačitvijo in kloniranjem genov

The ključna razlika med amplifikacijo genov in kloniranjem genov je, da je amplifikacija genov je postopek izdelave številnih kopij gena, ki nas zanima in vitro z verižno reakcijo polimeraze. Toda kloniranje genov je postopek izdelave številnih kopij gena, ki nas zanima in vivo tako, da naredimo rekombinantni plazmid in ga pretvorimo v gostiteljsko bakterijo.

Gen je poseben fragment DNK, ki kodira protein. Organizem ima na tisoče genov. Poleg tega je mogoče pomnožiti DNK zaporedja pomembnih genov z uporabo molekularno bioloških tehnik. Amplifikacija genov in kloniranje genov sta dva takšna postopka. Oba postopka tvorita veliko kopij zanimivega gena. Vendar obstaja razlika med gnojenjem in kloniranjem genov glede na njihovo metodologijo.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je genska ojačitev
3. Kaj je gensko kloniranje
4. Podobnosti med gensko ojačitvijo in kloniranjem genov
5. Primerjava ena ob drugi - Genska ojačitev in Gensko kloniranje v tabeli
6. Povzetek

Kaj je genska ojačitev?

Genska amplifikacija je postopek izdelave kopij določenega gena z uporabo verižne reakcije s polimerazo. Za pomnoževanje gena je treba DNK tega določenega organizma ekstrahirati z ustreznim protokolom ekstrakcije DNK. Potem je treba ekstrahirano dvojno verigo DNA denaturirati, da dobimo ločene enojne niti. Naslednji korak vključuje uporabo reakcije PCR za izdelavo kopij gena, ki vas zanima. Poleg tega PCR mešanica vsebuje potrebne primere, nukleotide, encim DNA polimerazo, šablonsko DNK in druge sestavine. Na koncu programa LRK se začne razširiti zanimiv gen.

Slika 01: Genska ojačitev

Poleg tega je genska amplifikacija prvi korak pri odkrivanju določenega zaporedja, identifikaciji organizma, diagnosticiranju bolezni in izdelavi genskih knjižnic itd..

Kaj je gensko kloniranje?

Kloniranje genov je metoda v genskem inženiringu, s katero lahko naredimo genske knjižnice ali naredimo veliko kopij gena, ki nas zanima. Ta postopek vključuje izdelavo rekombinantnega plazmida in pretvorbo rekombinantnega plazmida v gostiteljsko celico, zlasti v bakterijsko celico. Klon je identična kopija izvornega organizma ali molekule. Kloniranje genov lahko naredi na tisoče genskih klonov.

Slika 02: Gensko kloniranje

Ko je gen, ki vas zanima, identificiran, ga lahko ločimo od genoma določenega organizma tako, da ga omejimo s specifičnimi restrikcijskimi encimi. Po uporabi istega restrikcijskega encima je treba odpreti plazmide (vektorje), da vstavimo fragment gena. Nato se rekombinantni plazmid transformira v gostiteljsko bakterijo z uporabo različnih metod, kot je elektroporacija. Nekateri rekombinantni plazmidi vstopijo v gostiteljske bakterijske celice. Z antibiotikom lahko transformirane bakterije izberemo, izoliramo in gojimo v svežih medijih. Tako ta tehnika pomaga pridobiti milijone genskih klonov.

Kakšne so podobnosti med gensko ojačitvijo in kloniranjem genov?

• Amplifikacija genov in kloniranje genov sta dve molekularni biološki tehniki.
• Pri obeh teh tehnikah se določeno zaporedje DNA ali gen pomnoži v milijonih ali tisočkrat.
• Poleg tega sta obe tehniki izrednega pomena za številna znanstvena področja.

Kakšna je razlika med pomnoževanjem genov in kloniranjem genov?

Amplifikacija genov je postopek, ki uporablja kopije določenega gena z uporabo in vitro metoda, imenovana PCR. Po drugi strani pa je kloniranje genov postopek, ki uporablja kopije določenega gena in vivo z gradnjo rekombinantnih vektorjev in njihovo množenje v živem organizmu. Torej, to je ključna razlika med gnojenjem in kloniranjem genov. Poleg tega genska amplifikacija traja le nekaj ur, medtem ko kloniranje genov traja nekaj dni. Zato lahko tudi to obravnavamo kot razliko med amplifikacijo genov in kloniranjem genov. Poleg tega postopek genske amplifikacije kaže manj napak, medtem ko proces kloniranja genov kaže več napak.

Naslednja infografija povzema razliko med amplifikacijo genov in kloniranjem genov.

Povzetek - Genska ojačitev proti genskemu kloniranju

Amplifikacija genov je postopek izdelave kopij želenega gena z uporabo verižne reakcije polimeraze v pogojih in vitro, medtem ko je kloniranje genov postopek izdelave kopij zanimivega gena z uporabo rekombinantne molekule DNK in bakterije živega organizma / gostitelja. Tako je to osnovna razlika med gnojenjem in kloniranjem genov.

Referenca:

1. "Molekularno kloniranje." Wikipedia, fundacija Wikimedia, 2. avgusta 2019, dostopno tukaj.
2. "Genska ojačitev." Genska ojačitev - pregled | Teme ScienceDirect, na voljo tukaj.

Vljudnost slik:

1. "PCR" avtorja Madprime - Lastno delo (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia
2. "Koraki molekularnega kloniranja" avtorja Alexpicardal97 - Lastno delo (CC BY-SA 4.0) prek Commons Wikimedia