Gojenje živalskih celic se izvaja za vzdrževanje linij živalskih celic, da bi izvedli številne raziskovalne dejavnosti. Živalske celične linije se vzdržujejo v sterilnih pogojih in zahtevajo posebne tehnike. Uporabljajo se v študijah v zvezi s proizvodnjo cepiva za ugotavljanje obnašanja celice do rakotvornih in mutagenih snovi in pri raziskavah raka. Mediji za celično kulturo so zelo pomembni za uspeh kulture živalskih celic. Obstajajo različne vrste medijev celične kulture, kot so Dulbeccov Modificiran orel (DMEM) in Orlov minimalni bistveni medij (EMEM). DMEM je spremenjeno bazalno gojišče s povečano koncentracijo aminokislin in vitaminov do štirikrat. To vključuje tudi nekaj več nadomestkov, ki povečujejo stanje hranil v medijih. EMEM je ena izmed prvih vrst medijev kulture živalskih celic, ki jo je razvil Harry Eagle. Je preprost, bazalni medij z minimalnimi količinami sestavin hranil. The ključna razlika med dvema medijema je sestava hranil. EMEM je sestavljen iz najmanjših koncentracij hranil, potrebnih za rast kulture, medtem ko je DMEM veliko zapleten medij s povečano koncentracijo aminokislin in vitaminov.
1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je DMEM
3. Kaj je EMEM
4. Podobnosti med DMEM in EMEM
5. Primerjava zraven - DMEM proti EMEM v tabeli
6. Povzetek
Dulbeccov Modified Eagle’s Medium (DMEM) je modificiran medijski tip, ki se komercialno pripravlja kot kremasto bel prah. Ta je prilagojena iz EMEM, sestava hranil pa se spreminja s povečanjem koncentracije aminokislin in vitaminov. Koncentracija aminokislin se v primerjavi z bazalnim medijem poveča do dvakrat. Koncentracija vitamina se poveča do štirikrat, s čimer se poveča vsebnost hranil v mediju.
DMEM je spremenjen tudi z dodajanjem več soli, kot so železov nitrat, natrijev piruvat in nekatere nebistvene aminokisline, kot sta serin in glicin. Spremenjena je tudi koncentracija glukoze v medijih. Originalna formulacija je sestavljena iz 1000 mg / L glukoze, medtem ko se v DMEM koncentracija poveča do 4500 mg / L. DMEM zahteva tudi dopolnitev serumskega medija, saj ni popoln medij. Najpogosteje se DMEM dopolnjuje s fetalnim govejim serumom (FBS). FBS zagotavlja potrebne beljakovine in rastne dejavnike za proces kultiviranja.
PH medija se spreminja po dodatku natrijevega bikarbonata. pH medija pred dodajanjem natrijevega bikarbonata je približno 6,80 - 7,40, pH pa po dodajanju natrijevega bikarbonata v območju od 7,60 do 8,20. Temperatura shranjevanja medija je 2 - 8 0C.
Slika 01: DMEM
Orlov minimalni esencialni medij (EMEM) je eden prvih razvitih medijev v celičnem gojenju živalskih celičnih linij. Prve vrste živalskih celičnih linij, ki se gojijo z uporabo EMEM, vključujejo Mouse L celice in HeLa celice. Mediji EMEM so tudi vrsta spremenjenih medijev. Harry Eagle je prvi formuliral medij EMEM. Mediji EMEM so vključevali esencialne aminokisline in vitamine v minimalni koncentraciji, ki jo zahtevajo celične vrste. Nenujne aminokisline niso bile vključene v formulacijo, koncentracije glukoze in natrijevega bikarbonata pa se zmanjšajo. Čeprav so mediji vsebovali uravnoteženo količino minimalnih potreb za uspešno rast celic.
EMEM ni popoln medij. Zato je za uspešno rast celic sesalcev potrebno dopolnjevanje s serumom. EMEM se uporablja na številnih celicah in je še vedno priljubljen medij med raziskovalci celične kulture.
DMEM proti EMEM | |
DMEM je spremenjen tip bazalnega medija s povečanimi aminokislinami in koncentracijami vitaminov. To vključuje tudi nekaj več nadomestkov, ki povečujejo stanje hranil v medijih. | EMEM je ena izmed prvih vrst medijev kulture živalskih celic, ki jo je razvil Harry Eagle. Je preprost, bazalni medij z minimalnimi količinami sestavin hranil. |
Spremembe aminokisline | |
Koncentracija aminokislin se je v mediju DMEM povečala do dvakrat. | Najmanjša koncentracija aminokislin se uporablja v EMEM. |
Spremembe vitaminov | |
Koncentracija vitamina se je v DMEM povečala do štirikrat. | V EMEM se uporablja minimalna koncentracija vitaminov. |
Koncentracija glukoze | |
Koncentracija glukoze se je v DMEM povečala do 4500 mg / L. | Koncentracija glukoze je 1000 mg / L v EMEM. |
Prisotnost nebistvenih aminokislin | |
Prisotna v DMEM. | Odsoten v EMEM. |
Prisotnost dodatnih komponent | |
Sestavine, kot je železov nitrat, natrijev piruvat, so prisotne v DMEM. | EMEM vsebuje minimalno količino hranil. |
DMEM in EMEM sta dva priljubljena gojišča za celične kulture živali, ki se v glavnem razlikujejo po sestavkih hranil. DMEM je spremenjena oblika EMEM, kjer se koncentracije hranil povečajo skupaj z dodatkom nekaterih novih komponent. EMEM je minimalen medij in vsebuje vse bistvene dejavnike, potrebne za uspešno rast živalskih celičnih linij. Te medije je treba uporabljati v visoko sterilnih pogojih, oba medija pa pred uporabo dopolniti s serumom. To je razlika med DMEM in EMEM.
Lahko prenesete PDF različico tega članka in jo uporabljate za namene brez povezave, kot je navedeno v navodilu. Prosimo, prenesite PDF različico tukaj Razlika med DMEM in EMEM
1.Arora, Meenakshi. "Mediji o celični kulturi: pregled." Gradivo in metode, 25. november 2017. Na voljo tukaj
2. "Orlov minimalni bistveni medij." Wikipedia, Fundacija Wikimedia, 24. december 2017. Na voljo tukaj
1.'Lifetech-DMEM'By Phaeton68 - Lastno delo, (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia