Razlika med kromatografijo afinitete in ionske izmenjave

The ključna razlika med afiniteto in ionsko izmenjevalno kromatografijo je to lahko uporabimo afinitetno kromatografijo za ločevanje napolnjenih ali nepolnjenih komponent v mešanici, medtem ko lahko uporabimo ionsko izmenjevalno kromatografijo za ločevanje napolnjenih komponent v mešanici.

Kromatografija je tehnika, ki jo lahko uporabimo za ločevanje želenih komponent v mešanici. Obstajajo različne vrste, kot so tekoča kromatografija, plinska kromatografija itd. Afinitetna kromatografija in ionsko izmenjevalna kromatografija sta dve podkategoriji tekoče kromatografije. Tudi pri teh tehnikah obstajata dve fazi. Namreč, sta stacionarna in mobilna faza. Namen teh tehnik je ločiti komponente, odvisno od vezave komponent, v mobilni fazi na površino stacionarne faze.

VSEBINA

1. Pregled in ključne razlike
2. Kaj je kromatografija afinitete
3. Kaj je ionska izmenjalna kromatografija
4. Primerjava ob strani - kromatografija afinitete proti ionski izmenjavi v tabeli
5. Povzetek

Kaj je afinitetna kromatografija?

Afinitetna kromatografija je biokemična tehnika, ki jo uporabljamo za ločevanje komponent v mešanici, odvisno od interakcij med temi komponentami.

Interakcije, ki jih uporabljamo v tem primeru, vključujejo naslednje:

1. Interakcije antigen-protitelo
2. Interakcije encima in substrata
3. Interakcije receptor-ligand
4. Interakcije beljakovinsko-nukleinske kisline

Pri tej tehniki uporabljamo molekularne lastnosti molekul za to tehniko ločevanja. Tu omogočimo, da želena spojina vpliva na stacionarno fazo preko vodikove vezi, ionske interakcije, disulfidnih mostov, hidrofobne interakcije itd. Najprej bodo eluirale molekule, ki ne delujejo s stacionarno fazo. Tako ga lahko ločimo od mešanice. Želena spojina ostane vezana na stacionarno fazo. Zato ga lahko ločimo s topilom za eluiranje in ga tako izločimo, da ga tudi ločimo.

Slika 01: Kromatografski stolpec

Afinitetna kromatografija je uporabna pri čiščenju in koncentriranju snovi iz mešanice z uporabo puferske raztopine. Prav tako je koristno pri zmanjševanju neželenih snovi v mešanici. Pri obravnavanju aparata, ki ga uporabljamo za ta postopek, bi morali uporabiti stolpec, napolnjen z našo stacionarno fazo. Nato bi morali naložiti mobilno fazo, ki vsebuje biomolekule, ki jih bomo ločevali. Nato jim omogočite, da se vežejo s stacionarno fazo. Potem lahko s pufrom za pranje ločimo neciljne biomolekule, vendar morajo imeti ciljne molekule visoko afiniteto za stacionarno fazo, da bi uspeli postopek ločevanja.

Kaj je ionska izmenjalna kromatografija?

Ionska kromatografija je oblika tekoče kromatografije, v kateri lahko analiziramo ionske snovi. Pogosto ga uporabljamo za analizo anorganskih anionov in kationov (tj. Kloridnih in nitratnih anionov ter kalijevih, natrijevih kationov). Čeprav je to manj pogosto, lahko analiziramo tudi organske ione. Poleg tega lahko to tehniko uporabimo za čiščenje beljakovin, ker so beljakovine napolnjene molekule pri določenih pH vrednostih. Tukaj uporabljamo trdno stacionarno fazo, na katero se lahko nabodeni delci pritrdijo. Kot trdno podlago lahko na primer uporabimo smopolimerje iz smola polistiren-divinilbenzen.

Slika 02: Faze kromatografije ionske izmenjave

Za nadaljnjo razlago tega stacionarna faza ima fiksne ione, kot so sulfatni anioni ali kvarterni aminski kationi. Vsako to bi moralo biti povezano s protitonom (ion z nasprotnim nabojem), če želimo ohraniti nevtralnost tega sistema. V tem primeru, če je protition kation, potem sistem poimenujemo kationsko izmenjevalno smolo. Če pa je protiion anion, je sistem anionska izmenjalna smola.

V procesu ionske izmenjave je pet glavnih faz;

1. Začetna faza
2. Adsorpcija cilja
3. Začetek elucije
4. Konec elucije
5. Regeneracija

Kakšna je razlika med afiniteto in ionsko izmenjevalno kromatografijo?

Afinitetna kromatografija je biokemična tehnika, ki jo uporabljamo za ločevanje komponent v mešanici, odvisno od interakcij med temi komponentami, medtem ko je ionska kromatografija oblika tekoče kromatografije, v kateri lahko analiziramo ionske snovi. Zato je glavna razlika med afinitetno in ionsko izmenjevalno kromatografijo ta, da lahko uporabimo ionsko izmenjevalno kromatografijo samo za ločevanje ionskih snovi, medtem ko je afinitetna kromatografija sposobna ločiti tako nabito kot napolnjeno delce. Pri upoštevanju načela delovanja je razlika med afiniteto in ionsko izmenjevalno kromatografijo v tem, da se afinitetna kromatografija izvaja zaradi dejstva, da imajo ciljne molekule visoko afiniteto za stacionarno fazo. Vendar pa imajo za ionsko izmenjevalno kromatografijo ciljne molekule nasproten kot za stacionarno fazno površino.

Spodnja infografska slika prikazuje razliko med afiniteto in ionsko izmenjevalno kromatografijo kot primerjavo.

Povzetek - Kromatografija afinitete proti ionski izmenjavi

Če povzamemo, sta afinitetna in ionsko izmenjevalna kromatografija dve obliki tekoče kromatografske tehnike. Ključna razlika med afiniteto in ionsko izmenjevalno kromatografijo je, da lahko uporabimo afinitetno kromatografijo za ločevanje napolnjenih ali nepolnjenih komponent v mešanici, medtem ko lahko z ionsko izmenjevalno kromatografijo ločimo napolnjene sestavine v mešanici.

Referenca:

1. "Kromatografija afinitete." Wikipedia, fundacija Wikimedia, 5. oktobra 2018. Na voljo tukaj 
2. Prosti teksti. "Kromatografija z ionsko izmenjavo." Kemija LibreTexts, Libretexts, 29. december 2016. Na voljo tukaj  

Vljudnost slik:

1. "Nikelova smola" Pdcook - Lastno delo, (CC BY-SA 3.0) prek Commons Wikimedia 
2. "Iex" avtorja Daliak (Public Domain) prek Commons Wikimedia