DPBS proti PBS
PBS ali fiziološka raztopina s fosfatom in dulbeccova fiziološka raztopina s fosfatnimi pufri (DPBS) so puferirane fiziološke raztopine, ki se uporabljajo v bioloških študijah. PBS in DPBS se uporabljata pri raziskavah, ki vključujejo celice. Koncentracija in osmolarnost raztopine je izotonična, to je združljiva s človeškim telesom. Pufer omogoča zagotavljanje in ohranjanje stabilnega pH 7,2-7,6.
Med PBS in DPBS ni bistvene razlike. Oba vsebujeta natrijev fosfat, natrijev klorid in po potrebi kalijev fosfat in kalijev klorid. Drugi pripravki, na primer DPBS, lahko vsebujejo kalcij in magnezij ali ne. PBS in DPBS imata številne aplikacije, saj ne škodujeta celicam. Tako PBS kot DPBS se lahko uporabljata za izpiranje instrumentov ali posod, onesnaženih s celicami. Prav tako se oboje lahko uporablja pri redčenju snovi. Molekule vode v razredčilih, kot so beljakovine, se ustavijo in posušijo. Voda, ki se kombinira s snovjo, preprečuje, da bi snov podvrgla konformacijskim spremembam, kot je denaturacija. Raztopine kalcija in magnezija lahko omejijo aktivnost tripsina. V elipsometriji lahko adsorpcijo beljakovin merimo z osnovnim spektrom z uporabo PBS.
Fiziološka raztopina s fosfatom z dodatki, kot je EDTA, se lahko uporablja za ločevanje celic v paketu. Padavine nastajajo, ko se v PBS doda cink, dvovalentna kovina, zato ga ni mogoče dodati razvezati celic. Good's pufer se uporablja v tej vrsti namesto cinka.
Fiziološka raztopina s fosfatom in dulbeccova fiziološka raztopina s fosfatom pripravimo na številne načine. Eden od načinov priprave je z raztapljanjem 800 g. natrijev klorid, 20 g. kalijev klorid, 2 molekuli vode, 24 g. kalijevega fosfata in 144 g. natrijev fosfat v 8 L. destilirane vode. Rezultat bo 10 litrov 10x PBS. Neposredno izmerite pH vrednosti PBS z merilnikom pH pri pripravi puferiranih raztopin. PH raztopine je nastavljiv z uporabo natrijevega hidroksida ali klorovodikove kisline. Fiziološka raztopina, puferirana s fosfatom, kot redčilo se pripravi s končno koncentracijo 10 mM fosfata, 137 mM natrijevega klorida, 2,7 mM kalijevega klorida in pH 7,4. Fritsch, Sambrook in Maniatis imajo v svoji knjigi z naslovom "Molekularno kloniranje" svoj način priprave pufernih raztopin. V skladu s tem za liter 1x PBS začnite pripravo z 800 ml. vode, ki je destilirana. Vključite 8 g. natrijevega klorida kot tudi 0,2 g. kalijevega klorida. 1,44 g. Nato dodamo natrijev fosfat in nato 0,24 g. kalijevega fosfata. V klorovodikovo kislino nastavite pH na 7,4. Če želite dodati 1 liter PBS, dodajte več destilirane vode do izravnave do 1 litra. Dobljeno raztopino izvlecite v alikvot in uporabite avtoklav za sterilizacijo raztopine. Avtoklav prilagodite na 121 ° C in ga v svojem tekočem ciklu samodejno klavirajte 20 minut. Nato raztopino shranite na sobni temperaturi.
Čeprav se fiziološka raztopina, puferirana s fosfati, in raztopina dulbeccovega fosfata pripravimo na več načinov, je vsebina še vedno ista. Zato so ne glede na to, kako je pripravljena, rezultati in uporabe še vedno enaki.
Povzetek:
1.PBS ali fiziološka raztopina s fosfatom in Dulbeccova fiziološka raztopina s fosfatnimi pufri (DPBS) so puferirane fiziološke raztopine, ki se uporabljajo v bioloških študijah.
2. Koncentracija ionov raztopine in osmolarnost sta izotonična, to je združljiva s človeškim telesom. Pufer omogoča zagotavljanje in ohranjanje stabilnega pH 7,2-7,6.
3. Med PBS in DPBS ni bistvene razlike. Oba vsebujeta natrijev fosfat, natrijev klorid in po potrebi kalijev fosfat in kalijev klorid. Drugi pripravki, na primer DPBS, lahko vsebujejo kalcij in magnezij ali ne.
4.Blasti PBS in DPBS se lahko uporabljata za izpiranje instrumentov ali posod, onesnaženih s celicami. Prav tako se oboje lahko uporablja pri redčenju snovi. Molekule vode v razredčilih, kot so beljakovine, se ustavijo in posušijo. Voda, ki se kombinira s snovjo, preprečuje, da bi snov podvrgla konformacijskim spremembam, kot je denaturacija. Raztopine kalcija in magnezija lahko omejijo aktivnost tripsina. V elipsometriji lahko adsorpcijo beljakovin merimo z osnovnim spektrom z uporabo PBS.
5. Fiziološka raztopina s fosfatom z dodatki, kot je EDTA, se lahko uporablja za ločevanje celic v paketu. Padavine nastajajo, ko se v PBS doda cink, dvovalentna kovina, zato ga ni mogoče dodati razvezati celic. Good's pufer se uporablja v tej vrsti namesto cinka.
6.PBS in DPBS so pripravljeni na številne načine. Čeprav se fiziološka raztopina, puferirana s fosfati, in raztopina dulbeccovega fosfata pripravimo na več načinov, je vsebina še vedno ista. Zato so ne glede na to, kako je pripravljena, rezultati in uporabe še vedno enaki.